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甲硝唑检测试剂盒(酶联免疫法)
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江西江蓝纯生物试剂有限公司
详见说明书
83
科研试剂
酶联免疫法
96T/48T
配液 2:2M 氢yang化钠溶液 称取 40g 氢yang化钠,加入去离子水 500ml 溶解。配液 3:洗涤液将浓缩洗涤液 20 倍稀释(1 份洗涤液加 19 份去离子水)。配液 4:复溶液将2×复溶液用去离子水 2 倍稀释(1 份复溶液加 1 份去离子水),用于样本的复溶,复溶液在 4℃环境可保存一个月。5.3 样本前处理步骤:5.3.1 组 织(鸡、鸭肉/肝脏、鱼、虾、等)、蜂蜜 1)取 3g样本,加 3ml 0.1M 碳酸盐缓冲溶液振荡至蜂蜜全部2)加入 9ml 乙酸乙酯,振荡 5 分钟,室温 4000 转/分,离心5 分钟;3)取上层有机相 6ml 至另一离心管中,加入 2ml 乙酸乙酯,2ml 2M 氢yang化钠溶液,振荡 5 分钟,室温 4000 转/分,离心 5 分钟;4)取 4ml 清澈上层有机相至干净玻璃试管中,30~40℃氮气或空气吹干;5)加入正己烷 1ml,涡动 30s,再加入 0.5ml 复溶液混合 30秒,室温 4000 转/分以上,离心 5 分钟;6)去除上层有机相,取下层 50µl 液体用于分析。稀释倍数 0.5 检测下限 0.25ppb6 酶联免疫试验步骤将所需试剂从 4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于 2-8℃。6.1 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。6.2 加样反应:加标准品或样本 50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗体工作液 50µl/孔,轻轻振荡 5 秒混匀,25℃避光反应30分钟。6.3 洗 涤:将孔内液体甩干,用工作洗涤液 250µl/孔充分洗涤 5 次,每次间隔 30 秒,后用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。6.4 加酶反应:加酶标记物 100µl/孔,25℃避光反应 30 分钟。6.5 洗涤:同上6.6 显 色:加底物液 A 50µl/孔,再加底物液 B 50µl/孔,轻轻振荡 5 秒混匀,25℃避光显色 15 分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。6.7 终止:每孔加入终止液 50µl,轻轻振荡混匀,终止反应。6.8 测吸光值:用酶标仪于 450nm 处测定每孔吸光度值(建议用双波长 450/630nm)。测定应在终止反应后 10 分钟内完成。7 结果分析7.1 百分吸光率的计算标准液或样本的百分吸光率等于标准液或样本的百分吸光度值的平均值(双孔)除以个标准液(0ppb)的吸光度 值,再乘以 ,即
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