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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
88
- 英文名:
Insect histone Extraction Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
蛋白酶抑制剂-20℃
- 规格:
50T|100T
特别提示:包括昆虫组蛋白提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:昆虫组蛋白提取试剂盒
英文名称:Insect histone Extraction Kit
产品货号:HR0037
产品规格:50T|100T
昆虫组蛋白提取试剂盒适用于从各种昆虫组织样本中提取组蛋白。提取过程简单方便。组蛋白提取产物的产量大约0.4 mg每100 mg组织,不同的样本组织中,产量差异很大。如果需要提取昆虫的培养细胞样本的组蛋白,请选用产品号为HR0039的试剂盒。
提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、组蛋白修饰实验比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。
储存条件:蛋白酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
●蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
● 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
1.提取液制备:根据样品数量,每 400μl冷的蛋白提取液A中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物;每100μl冷的蛋白提取液B中加入1μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2.昆虫组织样本剪碎,用 5倍体积的提取液A 匀浆或研磨。
3.充分混匀,在4℃条件下振荡20分钟。或者置冰上20-30分钟,中间每隔5分钟涡旋混匀。
4.在 4℃,16000g条件下离心15分钟。
5.弃上清,收集沉淀。
6.在沉淀中加入 100μl试剂B 充分混匀,置4℃过夜。
7.第二天在 4℃,16000g条件下离心15分钟,收集上清。
8.在上清中加入 50μl试剂C,充分混匀,即得组蛋白样品。
9.将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
【注】
①细胞数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。
② 建议用 BCA法进行蛋白定量。
③蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
我公司销售的昆虫组蛋白提取试剂盒报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验法,在涂布有IPTG和X-Gal的筛选平板上,重组菌株为白色,未转入重组质粒的菌株为蓝色。 ◆ 可对小量提取的质粒DNA做限制性酶切,采用天为时代公司的质粒提取试剂盒,可快速提取多个样本,而且由于提取的质粒纯度高,不会有酶切切不开,影响实验的情况。 ◆ 也可直接用细菌菌落进行PCR反应,筛选存在目的片段的重组菌落。天为时代公司生产的一管便捷式PCR反应系统(MasterMix系列产品)特别适合这种方法。用灭菌的吸头挑取单个菌落到已加入MasterMix的PCR管中,加入特异引物,进行
-KB p65活性与测总的NF-KB p65活性意义是一样的,我想知道是不是这样? 3、对于NF-KB p65活性测定,用p-p65抗体测定时,组织蛋白提取能不能用全蛋白提取试剂盒?还是必须用包浆蛋白或者核蛋白提取试剂盒?检索版内资源,楼主曾建议提核蛋白,然后用磷酸化的p65测定。我想问,只有活化的p65才会入核,那么为什么一定要用核蛋白呢? 4、对于NF-KB p65活性测定时,内参应该选用actin还是GAPDH?如果用GAPDH做内参影响大吗? 期盼您的答复,谢谢
)从倍增基因获得,也可以来自人工合成的基因。通过PCR获得感兴趣的DNA的方法是:首先,分离含有感兴趣的DNA片段的mRNA的总RNA,并通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)将RNA逆转录成cDNA。根据公布的NCBI基因编码序列(CD)设计寡核苷酸引物,并在引物中加入指定的限制酶位点。然后,通过PCR扩增感兴趣的DNA的编码区,用凝胶提取试剂盒纯化后,将DNA片段插入克隆载体中。通过RT-PCR将RNA逆转录成cDNA通过PCR扩增感兴趣的DNA的编码区经验虽然从RT-PCR中获取DNA片段是常用
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