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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
332
- 英文名:
Magnetic Serum/Plasma DNA Maxi Extraction Kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
RT(15-30℃)干燥条件下,可
- 规格:
2ml×50次|2ml×200次|2ml×1000次
特别提示:包括游离核酸大量提取试剂盒(磁珠法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:游离核酸大量提取试剂盒(磁珠法)
英文名称:Magnetic Serum/Plasma DNA Maxi Extraction Kit
产品货号:WH0116
产品规格:2ml×50次|2ml×200次|2ml×1000次
本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统,从2-5ml体积血清、血浆等样本中分离纯化高质量游离DNA。独特包埋的磁珠,在一定条件下对核酸具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。整个过程安全、便捷,提取的游离核酸得率高、纯度高,质量稳定可靠,尤其适合高通量工作站的自动化提取。
产品特点:
·本试剂盒即可满足手工提取也可适用于多种高通量平台批量提取。
·本试剂盒所得产物满足下游各类检测实验以及NGS分析。
·本产品适用于2-5ml体积的血清血浆样本。
试剂盒组成:
| 组分 | 2ml×50次 | 2ml×200次 |
| 裂解液GHH | 2×80ml | 4×160ml |
| 缓冲液GDF | 36ml | 150ml |
| 漂洗液PWG | 20ml | 2×40ml |
| Proteinase K | 10ml | 4×10ml |
| 磁珠悬浮液E | 2×750μl | 6×1ml |
| 洗脱缓冲液TBC | 15ml | 30ml |
储存条件:室温(15-30℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,以溶解沉淀。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。)
1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的核酸片段较小且提取量降低。
2.若裂解液GHH中有沉淀,可在室温中重新溶解,摇匀后使用。
3.本试剂盒组分以2 ml样本为基础,如果提取其它规格的样本,试剂不够时需另行购买。
4.第一次使用试剂盒时,请按照试剂瓶上的提示在缓冲液GDF和漂洗液PWG中添加无水乙醇。
Carrier RNA溶液的配制(选购,货号RT416-02):
Carrier RNA是一种核酸捕获物,当样本中核酸含量较低时,使用Carrier RNA可以提高游离核酸提取效率。
向装有310μg Carrier RNA冻干粉的管子中加入310μl RNase-Free ddH2O,将Carrier RNA彻底溶解,得到终浓度为1μg/μl的溶液,并按实验情况分装到RNase-Free的离心管中,置于-20℃储存。使用时按照提取的次数取出相应的溶液,该溶液应避免反复冻融,冻融次数不能超过3次。
操作步骤:
使用前请先在缓冲液GDF和漂洗液PWG中加入无水乙醇,加入体积参照瓶上的标签。
1.根据样品体积按下表选择合适规格的离心管,依次加入血浆、裂解液、Proteinase K和1μl Carrier RNA(选购,目录号RT416-02)。
| 样品量 | 耗材规格 | 裂解液CFL | Proteinase K | 磁珠WD |
| 1ml | 5ml离心管 | 1.5ml | 100μl | 25μl |
| 2ml | 5ml离心管 | 3ml | 200μl | 30μl |
| 3ml | 15ml离心管 | 4.5ml | 300μl | 45μl |
| 4ml | 15ml离心管 | 6ml | 400μl | 60μl |
| 5ml | 15ml离心管 | 7.5ml | 500μl | 75μl |
注意:本试剂盒以2 ml样本为基础,如果提取其它规格的样本,请按照表格中的用量进行增减。
2.涡旋振荡混匀后室温孵育20min,期间每3-5 min上下颠倒混匀10 sec,使磁珠和核酸充分结合。孵育结束后需简短离心以去除管盖内壁的液滴。
3.将离心管置于磁力架上2 min,待磁珠完全吸附时用移液器小心去除液体,取下离心管。
4.加入750 μl缓冲液GDF(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),上下颠倒混匀30 sec使磁珠充分悬浮,简短离心以去除管盖内壁的液滴。
注意:可将步骤4中所有磁珠及液体转移至1.5ml规格磁力架进行后续操作。如果离心管壁上有残留磁珠,可以再加入200 μl缓冲液GDF漂洗,然后一并转移到1.5ml离心管中。
5.将离心管置于磁力架上1 min,待磁珠完全吸附时用移液器小心去除液体,取下离心管。
6.加入750 μl漂洗液PWG(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),上下颠倒混匀30 sec使磁珠充分悬浮,简短离心以去除管盖内壁的液滴。
7.将离心管置于磁力架上1 min,待磁珠完全吸附时用移液器小心去除液体,取下离心管。
8.重复步骤6和7一次。
9.将离心管置于磁力架上,室温晾干5-10 min。
注意:乙醇残留会抑制后续的酶反应,所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间,以免难以洗脱核酸。
10.加入25-65 μl洗脱缓冲液TBC,用移液器吹吸使磁珠重新悬浮,56℃孵育5 min,期间每2min轻轻晃动使核酸充分洗脱。
11.将离心管放置于磁力架上静置2 min,待磁珠完全吸附时小心将核酸溶液转移至新的离心管中,并于适当条件保存。
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文献和实验的效率大幅度提升。但是也出现了另一个问题,那就是在有限的样本量的前提下,我们如何能够抓取到痕量的核酸呢?以提取血清血浆样本中的游离核酸为例,常规的试剂盒很难处理这样的情况,需要试剂盒中配备一些特殊组份来捕捉这些游离核酸,并帮助其结合在柱膜上,所以大家在购买试剂盒的时候需要做好选择。 接下来就是洗脱或者溶解了,目前市面上所售的各种试剂盒大多采用硅基质膜,这种膜的特点是在高 pH 值条件下与核酸分离,所以我们如果不选择试剂盒中的洗脱液的话,我们可以用 pH 7.5-8.0 的水来代替
质分子量标准(19-119KD) (50次)--每支 280元 五. 秋季部分产品特价促销单 具体产品和价格如下: 一. DNA分子量标准产品: DNA分子量标准 规格 优惠价 DL2000 50次 58元 参照片断(bp):100 、250、500、750、1000、2000bp Marker1 50次 58元 参照片断(bp):100 、200、300、400、500、600bp Marker2 50次 58元 参照片断(bp):100 、300、500
测试5个样本,均为保存7,8年的陈旧血,且反复冻融,有的血颜色很淡,稀薄。这是艾德莱产品(DN01)500ul全血提取结果(2微升DNA上样,marker 4微升)。胶孔无任何残留。进一步优化操作步骤后,质量更好,轻松上芯片。 用户从前使用QIAGEN的盒子,大部分提的DNA胶图上孔里残留较多的蛋白,纯度差,产量偏低,不能上芯片。下图是一个QIAGEN DNA电泳图(上样孔明显杂质残留)。 结论:艾德莱的试剂盒性价比远超QIAGEN数倍,上芯片分析首选艾德莱全血提取试剂盒!
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