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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
367
- 英文名:
Nuclear / cytoplasmic separation Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃
- 规格:
50T|100T
特别提示:包括细胞核/胞浆分离试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞核/胞浆分离试剂盒
英文名称:Nuclear / cytoplasmic separation Kit
产品货号:HR0241
产品规格:50T|100T
细胞核/胞浆分离试剂盒可以从哺乳动物细胞中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统,维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆,而几乎没有交叉污染。
本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能,适合下游分析如转录活性,RNA拼接,gel-shift分析,报告分析,酶活性分析和WB等。
储存条件:提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1.取5-10×106个细胞①,在4℃,500×g条件下离心2-3分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
2.用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.在细胞沉淀中加入 200μl冷的提取液A,涡旋振荡混匀或吹打混匀,置冰上振荡30分钟。(没有振荡条件的话,也可冰上静置,中间每隔5分钟涡旋振荡或吹打混匀。)
4.在 4℃,1200×g条件下离心5分钟。
5.将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到胞浆组分,请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
6.沉淀用 PBS 洗涤一次,然后在4℃,2000×g条件下离心5分钟,弃上清。
7.沉淀为细胞核组分,将沉淀用200μl保存液B重悬后保存备用或直接用于下游实验。
注:
①细胞数量根据实验情况调整,每次的提取液用量并不是一定的,大约为细胞体积的5-10倍即可,请根据实际情况调整。
我公司销售的细胞核/胞浆分离试剂盒报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验,首先使用 Invent 柱式法胞质胞核分离试剂盒将样品分为胞浆蛋白和胞核蛋白,每组按照胞浆组分,胞核组分顺序分别上样,使用 GAPDH 作为胞浆内参,LaminA/C 作为胞核内参,验证胞质胞核分离成功无交叉污染。 检测目标蛋白 NF-ĸB p65,验证了过表达 circ-Sirt1 的血管平滑肌细胞(VSMCs)中,TNF-ɑ 诱导的 NF-ĸB p65 的核易位被显著抑制,并伴有促炎细胞因子和黏附分子表达减少(图 E)。相反,敲低内源性 circ-Sirt1 增强了 TNF-ɑ 诱导的 NF-ĸB
分离后通过免疫沉淀或免疫印迹检测细胞内特定蛋白质的移动。例如,对某个细胞系中某个对质膜蛋白转运有影响的特殊因子感兴趣,可以用这个因子处理细胞,处理后的细胞通过离心富集。然后将处理过的细胞和没有处理过的细胞分别分离成不同组分。许多传统方法和商业试剂盒可以将细胞/组织分离成亚细胞结构例如胞浆,质膜,细胞器和细胞核。通过使用特异性抗体免疫印迹对比目标膜蛋白的分布。这种研究方法的基本要求是分离出的亚细胞组份必须相对干净。在市场上有许多细胞组分分离试剂盒,但是通常都具有显著的交叉污染,所以仔细选择细胞组分分离试剂盒
细胞核蛋白质提取试剂盒 Nucleoprotein Protein Extraction Kit 产品说明:本试剂盒提供独特的组份,采用特殊的非离子型去污剂,以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂,能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞,经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白,释放的细胞核能够保持完整,再用Lysis Buffer对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性,因此该产品可合适用于SDS-PAGE电泳、Western Blot、免疫共沉淀,EMSA
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