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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
418
- 英文名:
BCA Protein Assay Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
按要求
- 规格:
500微孔(50T)|500微孔(50T)*10
特别提示:包括BCA蛋白浓度测定试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:BCA蛋白浓度测定试剂盒
英文名称:BCA Protein Assay Kit
产品货号:QN1075
产品规格:500微孔(50T)|500微孔(50T)*10
碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
操作说明:
一. 微孔酶标仪法
1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品:取10μL BSA标准品用PBS稀释至100μL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20μL加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足至20μL。
3. 将样品作适当稀释(zuì好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20μL到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
二. 分光光度计法 如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。 步骤如下:
1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品:取100μL BSA标准品用PBS稀释至1mL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。
3. 取八支(或者更多)5mL离心管,标上号,按下表加入试剂。
4.37℃放置15~30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。
注意事项:
1. 长期不用时,Cu试剂与PBS稀释液可置于2~8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。
2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:按要求储存,有效期1年
我公司销售的BCA蛋白浓度测定试剂盒现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
公司名字暂略(其实主要的还是那几家),但是给出了参考价格,方便大家事先做好预算,好跟老板汇报。 好,下面是常用的试剂 我尽量按照做western的顺序来讲 一、 样品制备 货号 名称 规格 单价 P0013 Western及IP细胞裂解液 100ml 158.00元 ST506 PMSF(100mM) 10ml 92.00元 P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒 200次 139.00元 二、蛋白电泳 P0012A SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 1盒 139.00元
的Western及IP细胞裂解液,可以使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制,也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配 胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS
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