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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
63
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)ELISA试剂盒实验前的准备
1、仔细阅读说明书
2、确认试剂盒时间在有效期内
3、按说明书确认全部试剂盒完全(数量、体积)
4、标本制备要标准,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份,短期内无法实验者,注意低温保存
5、准备全部实验额定所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等
6、根据检测标本数量确认所需试剂的量
7、按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂
8、选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,有必要辨认不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体。
① 更加安全:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
② 有经济性:试剂在平等质量条件下经过大规模出产或技术进步降低成本而商场价格比合理。
③ 运用的一次性制品如手套、帽子、工作物、口罩等运用后放入污物袋内会集焚毁。
④ 可重复使用的玻璃器件如玻片、吸管、玻瓶等可以用1000-3000mg/L有效氯溶液浸泡26h.然后清洗从头运用,或者抛弃。
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文献和实验起来以检测蛋白的数量;阳性和阴性对照也需要使用在试剂盒中GTP和 GTP-gamma-S reagents进行准备.然后将PAK-1 PBD beads加入到细胞裂解液中(10 ul of beads for every 500 ul of cell lysate).接着孵育以保证Rac1-GTP的结合,使用buffer 清洗the beads以去除细胞碎片和没有结合的Rac1。 最后,加入 laemmli buffer (not provided)到 beads,将泥浆使用anti-Rac
,但其酶活性较低。而GTP酶激活蛋白(GAP)则能促进GTP酶活性,使Ras蛋白水解GTP的速度提高1万倍,因此也是Ras通路的重要调节因素。另外,活化的Ras能直接结合并激活磷脂酰肌醇―3―激酶(P13K)的P110催化亚基,P13K活化后将二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)转化而生成第二信使三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3),然后通过Rac/Cdc42等来调控细胞骨架运动,以及通过激活生存信号激酶PKB/AKT等靶蛋白来调控细胞生存。另外,鸟嘌呤解离刺激因子(RalGDS)是一种Ras相关蛋白Ral的GTP
。 固有免疫中针对TLR信号转导的反馈调节 ASK1:凋亡信号调节激酶1; IRAK:IL-1受体相关激酶; MAPK:丝裂原激活蛋白激酶; MyD88:髓样分化因子88; NF-κD:核因子;Rac: 小G蛋白; SIGIRR:单一IgIL-1R相关分子; TIRAP:TIR(To11/IL-1受体)相关蛋白; TRAF6:TNF受体相关因子6。 在这些负向调节因子的作用下,可构成针对PAMP特别是其中I。PS应答的无反应期,防止因细胞因子过度产生而引起
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