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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
234
- 英文名:
E.coli XL1-Blue Chemical Competent Cell
- 保质期:
半年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
0.1mL*10
特别提示:包括大肠杆菌XL1-Blue化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:大肠杆菌XL1-Blue化学感受态细胞
英文名称:E.coli XL1-Blue Chemical Competent Cell
产品货号:BTN90504
产品规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌XL1-Blue菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。该菌株适用于高效的DNA 克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定复制;适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107。本感受态细胞具有四环素抗性。
菌株的基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 relA1 lac[F- proAB laclqZΔ M15 Tn10(Tetr)]。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
我公司销售的大肠杆菌XL1-Blue化学感受态细胞北京现货,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验的电转化感受态细胞特别耐受电击处理,方便好用,在DNA材料极珍贵、量少时,或构建有代表性文库时,建议采用电转化感受态细胞。ElectroTen-Blue®细胞是目前商品化的电转化感受态细胞中效率最高的,达到>3 x 1010 转化子/μg 超螺旋DNA。此外XL1-Blue,XL1-Blue MRF’,SURE®,ABLE® 和TG1等细 胞也提供电转化形式感受态细胞。SURE® -克隆不稳定 DNA 大肠杆菌DNA修复系统会针对重复序列、二级结构(如Z-DNA)等真核DNA进行重排或删除
,求助精英们的标准制作方法。多谢! 分子克隆第三版中感受态细胞制备方法 电转化: 急!!!求助:如何提好XL1-BLUE的电激感受态细胞? 电转化感受态细胞用DMSO是不是比甘油效果好? 我的感受态细胞为什么做不好? 酵母真核表达的感受态细胞的制备及电击转化的参数? 革兰矢阳性细菌感受态感受态的制备 感受态相关问题: [url=http://www.dxy.cn/bbs/thread/829396 [url=http://www.dxy.cn/bbs
1.目的 学会CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞。 2.原理 细菌在0℃ CaCl2低渗溶液中胀成球形,丢失部分膜蛋白,成为容易吸收外源DNA的状态。 3.器材 旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,50ml 微量离心管,1.5ml 微量离心管,双面微量离心管架,台式冷冻离心机,制冰机,恒温摇床,分光光度计,超净工作台,恒温培养箱,摇菌试管,三角烧瓶,接种环。 4.试剂 E. coli XL1-Blue,LB培养基,0.1 mol/L CaCl2溶液,无菌ddH2O 5.实验
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