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24
- 英文名:
d-mCherry-GFP-LC3B
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详见说明书
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研生
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4℃保存,一年有效。
- 规格:
500次
LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3 (MAP1LC3)。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族,其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止,LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个氨基酸残基的蛋白,在蛋白合成后,被Atg4所酶切而失去了C端的22个氨基酸蛋白,从而暴露出C端的甘氨酸,人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中,其C端暴露的甘氨酸经过一个类似泛素化的过程,以ATG7为E1样激活酶(E1-like activating enzyme),以ATG3为E2样连接酶(E2-like conjugation enzyme),以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶(E3-like ligase),在C端甘氨酸上共价连接上磷脂酰乙醇(phosphatidylethanolamine, PE)而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同,LC3B II定位于自噬体(autophagosome)的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后,自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切,而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大,但由于其极强的疏水性,在SDS-PAGE电泳时,LC3B II比LC3B I迁移得更快,其表观分子量分别为14kD和16kD。自噬(Autophagy)是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关,在饥饿等不利的环境条件下,细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分,为细胞的生存提供能量及原材料,促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用,自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。
| 编号 | 产品名称 | 规格 |
| YS-X6628 | d-mCherry-GFP-LC3B | 500次 |
-80℃保存,一年有效。-20℃保存,1-2个月内有效。4℃保存,一周内有效。
注意事项:
反复冻融会降低病毒滴度,如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后,如果在一周内使用,可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年,可能会导致滴度下降,此时建议重新测定病毒滴度。
腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体,请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1),没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病(Not known to consistently cause diseases in healthy adults),可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作(Standard microbiological practices)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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d-mCherry-GFP-LC3B 钠结晶紫增菌液/Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth副溶血弧菌的选择性增菌培养250克国产/进口
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文献和实验细胞)以及追踪整个时间段内的细胞(分化过程中受到监控的细胞)。 确定这些轨迹后,就可以绘制 mCherry 和 YFP 的强度随时间变化的曲线,以获得有关细胞周期动力学的定量信息(图 6c、d、e)。 图 6. a) 用于过滤长轨迹的轨迹寿命直方图 (R01)。b) 带有轨迹初始和最终时间点的散点图,用于确定从开始到结束过程中追踪的细胞(R01 和 R04)。c)、d) 和 e) 追踪时间超过 24 小时的 mCherry 细胞的动力学轨迹,分别包含早期起点和终点、早期起点和晚期终点以及晚期起点
光显微镜下几乎无信号的低丰度表达基因 Sox2、Tet1、Sall4、Tbx3 等(图 2b)。 图 2:(a)示意图显示 P2A-mcherry 和 SPH-OminiCMV-Ents 两种标记基因的策略。 (b)在 mESC 细胞中用 SPH-OminiCMV-Ents 策略(红色三角形)和 P2A- mCherry 策略(绿色菱形)标记不同的基因,统计其 mCherry 荧光信号强度以及用 qPCR 分析这些基因的表达水平(紫色圆圈,紫色 y 轴)。 为探讨增加 sgRNA 拷贝数是否会
小,因此能够监测在细胞代谢过程中的基因变化。通过对比LPS处理的巨噬细胞周期实验发现,Live-seq技术与对照组的细胞代谢水平相比没有明显变化,因此这种方法测量的数据十分接近细胞代谢中基因表达的真实水平。通过测序对比LPS处理与空白的测序结果发现Nfkbia与Tnf的表达为相关。这一结果也验证这种测序方法在检测细胞下游表型时的优势。 图4. Live-Seq技术的单细胞纵向分析。a. 实验示意图;b. 不同处理细胞的mCherry强度变化;c. 3~7.5h之间mCherry强度变化;d
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