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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
African Cassava Mosaic Virus(ACMV)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20度
- 规格:
50次
中文名称:非洲木薯花叶病毒PCR试剂盒
英文名称:African Cassava Mosaic Virus(ACMV)
规格:50次
运输:低温
保存:-20度
有效期:一年
货期:一周
产品及特点
1.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
2.荧光定量 PCR 检测,反应特异性强。
3.提供阳性对照,便于分析实验结果。
4.PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳,本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(最好用带芯枪头,下同)。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
1.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
2.换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
3.换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
4.NC 管中不加任何阳性对照。
5.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值, 并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
一.PCR 检测(20 μL 体系)
1.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次)
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照,其他荧光 PCR 仪器(如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480)不需要使用 ROX。
建议 PCR 反应参数(具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化)
3. 数据采集
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,最大吸收光谱在 471 nm,结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm, 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验大,钟状, 5裂,呈花瓣状,黄白而带紫色;雄蕊 10, 2轮;花柱 3,下部合生。蒴果椭圆形或圆球形,具 6条狭而波状的纵棱。染色体基数 x=9。木薯栽培以非洲最多,其次是亚洲。栽培品种达 2000个,主要优良品种有:面包木薯、南湾木薯、红尾种、印尼细叶、南洋紫皮、南洋青皮、糯米木薯等。木薯经济价值很高,块根富含淀粉,可食用或作糊料,为工业上用粉的主要原料。木薯块根有毒,含氰酸毒素和单宁,不能生吃,需要经过充分漂浸,煮熟后方能食用。鲜叶和嫩茎可作饲料或喂鱼,茎可烧炭或做造纸原料。
,一些信号优先出现在基因组中没有基因的区域。这两种作物也显示了暴露在太阳紫外线下引起突变的证据。近年来,人们对CRISPR/Cas9系统操纵基因组的潜力感到非常兴奋。该系统允许研究人员在基因组中的特定位置进行切割。削减开支后,接下来会发生什么取决于研究人员的目标。切割可以用来灭活一个基因,也可以用另一个序列来改变基因的行为。我们最近发表的一些研究以有趣的方式在植物中使用了CRISPR/Cas9。Devang Mehta和他的同事们正试图利用CRISPR/Cas9使木薯植株对木薯花叶病毒具有抗性,这种毁灭
9在自然界中被发现,细菌利用它来抵御病毒,但是研究人员发现,这项技术在植物中产生了非常不同的结果——研究人员强调了未来对这些意想不到的结果进行筛选的重要性。木薯是本研究的对象,在整个热带地区作为食物食用的淀粉根蔬菜。木薯是生长在南美、非洲和亚洲的主要农作物,每天有10亿人从中获得大部分卡路里。每年,木薯作物都会遭受木薯花叶病的困扰,造成20%的作物损失。这是Mehta同事们努力想要解决花叶病。③ Cancer Cell 另辟蹊径 寻找肥胖与癌症的全新关联肥胖已经逐渐成为了吸烟以外的第二大癌症可预防原因
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