双链DNA定量检测试剂盒优惠促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖双链DNA定量检测试剂盒优惠促销在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：双链DNA定量检测试剂盒优惠促销
规格：2000T
编号：SY0260
英文名：Picogreen dsDNA Assay Kit
产地：国产|进口
Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料，常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建，DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义，疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。

常用的检测核酸的方法有:1）紫外吸光法（A260），该法操作简便，但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大，还容易受到核酸样品中污染物的干扰，不能区分DNA和RNA，而且灵敏度低（ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA）；2）探针杂交法，该法是传统检测微量DNA的常用方法，基本能满足目前疫苗和治疗性生物制品的检测需求，但是该法耗时较长，操作繁琐，稳定性、敏感性和特异性较差；3）Hoechst33258染料法，Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料，基本不受蛋白质等污染物的干扰，可以检测低至10ng/ml的DNA；在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。

Picogreen dsDNA定量法：Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性，且几乎无序列依赖性，可以精确地测量多个来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。

相比传统的方法，Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势：
①灵敏度高：数量级较UV吸光读数更敏感，可节省宝贵的样品；
②特异性强：在等摩尔的RNA存在的条件下，对dsDNA具有特异性；
③耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、*仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
④易于使用——只需在样品中加入染料，等待5分钟，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。
⑤适用范围广：可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

若每次分析体积为2 mL，本试剂盒各组分试剂足够200次分析使用，若使用微孔板或96孔板检测，每次使用量200µl，则各组分试剂足够2000次分析。

产品组份：

 

组分名称	产品编号/规格	保存
dsDNA Quantitation Reagent	100µl×10	2～6℃避光干燥
2×TE buffer	50ml	2～6℃（短期）或-20℃（长期）
Calf thymus DNA standard (100µg/ml)	1ml	2～6℃（短期）或-20℃（长期）

注意事项

1）Picogreen定量试剂含有DMSO（已知有毒试剂），请小心操作；
2）尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性，但是该试剂能结合双链DNA，请操作时务必小心。

试剂准备
1）1×TE buffer 的配制：将2×TE 用无菌去离子水（不含Dnase）等体积稀释至1×工作液。
2）PicoGreen工作液的配制：使用前将PicoGreen dsDNA定量试剂回温至室温；PicoGreen是以100µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的（共10管）。实验当天，根据实验需求用1×TE按1:200 的比例稀释适量定量试剂浓缩液。例如要准备足够的操作溶液以2ml检测体系测定20个样品，可向19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。
【注】：
a、由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。
b、PicoGreen 试剂见光易降解，所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
c、溶液最好在配制好数小时内使用，以保证最佳结果。

检测步骤
1、 2µg/ml的Calf thymus DNA standard浓缩液的配制
用1×TE对Calf thymus DNA standard (100µg/ml)进行50倍稀释，即向30µl Calf thymus DNA standard加入1.47ml 1×TE混匀即可。
2、 标准曲线的制备
① 比色皿体系检测---（2ml）
a、按照表1 向一次性微量比色皿中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard，随后加入1ml PicoGreen定量试剂，混匀后，于室温避光孵育2-5min，并以1×TE缓冲液为blank。
【注】：确信不要在样品中引入气泡，轻轻地弹微量检测皿的外部，可以驱散气泡。
 

TE (µl)	2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl)	稀释的PicoGreen定量试剂(µl)	Calf thymus DNA standard终浓度
0	1000	1000	1µg/ml
900	100	1000	100ng/ml
990	10	1000	10ng/ml
999	1	1000	1ng/ml
1000	0	1000	blank

表1 比色皿体系所需加入各组分量及标准品终浓度表

b、于荧光仪中检测各浓度荧光值，Ex/Em=480nm/520nm。
【注】：为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内，应调节增益使含最高DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的最大值一致；为了减少光漂白，应保持所有样品的检测时间一致。
c、各浓度得到的荧光值减去空白对照荧光值，对DNA浓度和荧光值做标准曲线。
② 微孔板体系检测（200µl）
a、按照表2 向96孔板中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard，随后加入100µl PicoGreen定量试剂，混匀后，于室温避光孵育2-5min，并以1×TE缓冲液为blank。【注】：确信不要在样品中引入气泡，轻轻地弹微量检测皿的外部，可以驱散气泡。
 

TE (µl)	2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl)	稀释的PicoGreen定量试剂(µl)	Calf thymus DNA standard终浓度
0	100	100	1µg/ml
90	10	100	100ng/ml
99	1	100	10ng/ml
99.9	0.1	100	1ng/ml
100	0	100	blank

表1 酶标板体系所需加入各组分量及标准品终浓度表

b、于荧光酶标仪中检测各浓度荧光值，Ex/Em=480nm/520nm。
【注】：为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内，应调节增益使含最高DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的最大值一致；为了减少光漂白，应保持所有样品的检测时间一致。

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·X-press Tag多肽
编号：SY0430
英文名称：X-press Tag Peptide
规格：5mg
X-press Tag多肽（X-press Tag Peptide）是一种N-端前导肽，Anti-Xpress抗体可以识别Xpress表位，因此，X-press Tag多肽可用来纯化X-press Tag融合蛋白。

多肽序列（Amino acid sequence）：H-Asp-Leu-Tyr-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-OH
分子式：C41H59N9O20
分子量：997.96
外观：白色粉末
纯度：＞99%
溶解性：溶于水或1%醋酸
储存条件：-20℃，有效期1年

·27mm透析袋(透析分子量25kDa)
编号：SY0414
英文名称：Dialysis Tube MD34 (Mw25,000)
规格：1卷（1米）
透析袋通常为半透膜制成的袋状，以此为屏障对目的蛋白进行脱盐以及进行缓冲液的置换，透析的主要原理是：透析袋内样品的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到透析袋外，直到透析袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析袋透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析。

本透析袋参数：扁平宽度为34mm，直径27mm，截留分子量25kDa。
储存条件：4℃，有效期2年。

注意事项
1）每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好，以防干裂。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
1）把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段，具体长度需根据待透析的样品而定。
2）在大体积（eg.500mL）的2%（W/V）的碳酸**和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
3）用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4）放在大体积（eg.500mL）的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中将之煮沸10min。
5）冷却后，存放于4℃，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。【注】：从此时起取用透析袋必须戴手套。
6）在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。
7）使用时，一端由透析夹夹紧，另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液。
【注】：
① 通常要留1/3～1/2的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大或样品含盐量较高时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
② 为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用转子边搅拌边透析。透析的容器要大，如大烧杯等。

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