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Super TaqMan OneStep RT-qPCR Kit
长期
北京百奥莱博科技有限公司
-20℃
100次
特别提示:包括一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
组份 | 100次 |
2×Super TaqMan OneStep Buffer | 1.4ml |
Super OneStep Enzyme | 100μl |
RNase-Free Wat er | 1ml |
试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
2×Super TaqMan OneStep Buffer | 12.5μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
Probe,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
Super OneStep Enzyme | 1.0μl | |
RNA Template | Xμl | 10 pg~100ng |
RNase-Free Water | up to 25μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
逆转录 | 45℃ | 20 min | |
PCR预变性 | 95℃ | 2-5 min | |
变性 | 95℃ | 15 s | 30-40个循环 |
退火/延伸 | 60℃ | 30-45 s |
50μl反应体系 | 终浓度 | |
2×MasterMix | 25μl | 1× |
上游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-0.8μM |
下游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-0.8μM |
模板 | ×μl | 10pg-1μg |
水 | 补至50μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
初始变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 0.5kb/min | |
zuì后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
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