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- XK-SJH-3143
- 2025年11月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
49
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 检测范围：
详询
- 检测方法：
酶联免疫
- 应用：
科研
- 适应物种：
人
- 标记物：
HRP(辣根过氧化物酶)
- 样本：
血清、血浆、组织液等液体样本
- 规格：
48T/96T
检测范围： 96T
2.5ng/L-80ng/L
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中MHCⅡ/HLA-Ⅱ含量。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品（160ng/L） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA检测试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 80ng/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 40ng/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 20ng/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 10ng/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 5ng/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA检测试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA检测试剂盒保存条件及有效期
1.保存：2-8℃。
2.有效期：6个月
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文献和实验分子的分布及功能相似且均具有高度多态性，也被称为经典的HLAⅡ类基因。 (4)HLA-DM亚区：DM亚区位于HLA-IX)A和PSMB8之间，由二个座位即DMA和DMB组成，分别编码DM分子的。链与日链。DM基因具有多态性。DM异二聚体分子主要存在于特定的细胞器称MHCⅡ类区室(MⅡC)，在外源性抗原加工提呈中起重要而独特的作用。 (5)TAP和PSMB区域：DMB和DQB2之间有一对抗原加工相关转运物基因TAPl／TAF2和一对p型蛋白酶体亚单位(proteasomesubunit
MHC I 类和Ⅱ类分子抗原结合槽的结构特点 比较I类和Ⅱ类分子以各自的抗原结合槽接纳抗原肽的特点。这一特点仅仅体现了两类分子相互作用中的共性。 MHC I类分子和Ⅱ类分子抗原肽结合槽的结构和相应的功能特点 I类分子α1和α2结构域各含4段β―片层和一个α―螺旋，共同组成I类分子的抗原肽结合槽，是氨基酸(α．α．)组成变异性最大的部分。该槽两端封闭，一般只能容纳8―10个氨基酸残基组成的小肽
MHCⅡ类分子荷肽 九聚体进入内体后，在蛋白水解酶的作用下，L链逐步降解，最后仅剩与Ⅱ类分子抗原结合槽相连的CLIP。为了使内体中的外源性抗原肽进入抗原结合槽，需借助HLA-DM分子使ClAP与Ⅱ类分子解离。存在于内体溶酶体中的DM是一种非经典Ⅱ类分子，由。链和卢链组成。DM与Ⅱ类分子先发生物理性结合，引起Ⅱ类分子构象的改变，使得抗原结合槽中两条『螺旋略微分离，破坏了CLIP与抗原结合槽形成的非共价键，ClAP因而从抗原结合槽解离。
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