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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
Brucella Bovis PCR Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 规格:
48T
牛布鲁氏杆菌(Brucella bovis,又叫Brucella abortus)又叫流产布氏杆菌,是一种革兰氏阴性的不运动细菌,无荚膜(光滑型有微荚膜),触酶、氧化酶阳性绝对嗜氧菌,可还原硝酸盐,细胞内寄生,可以在牛体内存活,也能引起人类疾病。一头奶牛如果感染布鲁氏杆菌,没有得到及时的清洁和防疫,布病很快会在牲畜群体里暴发,进而增加人被感染的几率。其特点是生殖器官、胎膜及多种器官组织发炎、坏死和肉芽肿的形成,引起流产、不孕、睾丸及关节炎等症状。感染人后可能导致多个器官或脏器系统,骨骼或关节的病变,感染组织中可观察到具有组织学特征的肉芽肿。晚期可能失去劳动能力、卧床不起、出现神经或精神病方面的症状。因此牛布鲁氏菌的检测具有重要的意义。本试剂盒根据PCR原理开发,它具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化,专一性强,只扩增牛布鲁氏杆菌。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 |
包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(亮黄盖) |
| 超纯水 | 1 mL(蓝色) |
| 牛布鲁氏杆菌PCR引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 牛布鲁氏杆菌PCR阳性对照 (1×10E8拷贝/ul) |
50μL(黄盖) |
| 核酸释放剂 | 20次(1ml,绿盖) |
| 使用手册 | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂
自备试剂:
样品DNA
牛布鲁氏杆菌PCR试剂盒使用方法:
一、样品DNA的制备
(1)如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
(2)用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送20次免DNA提取的DNA释放剂,本产品的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。其使用手册可咨询本公司客服索取。
二、设置PCR反应(40 μL体系)
(3)对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成分 | N+2个样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 牛布鲁氏杆菌 PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18 μL | - | - |
| PCR阴性对照 | - | 18 μL | - |
| PCR阳性对照(用牛布鲁氏菌PCR阳性对照的10000倍稀释液) | - | - | 18 μL |
(4)按下表设置PCR反应:
| 过程 | 温度 | 时间 | |
| 预变性 | 94℃ | 5 min | |
| PCR反应 (35个循环) |
94℃ | 30 sec | |
| 55℃ | 30 sec | ||
| 72℃ | 60 sec | ||
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min | |
三、电泳检测
(5)取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为270bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
牛布鲁氏杆菌PCR试剂盒关联产品:
牛布鲁氏杆菌可视化LAMP扩增试剂盒
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文献和实验牛分枝杆菌在生长特性、化学组成及毒力的潜在性上与结核杆菌极少相似。本为牛的致病菌,引起牛的结核感染,人由于食入未经消毒或已污染了此菌的牛乳而被感染。牛分枝杆菌一般不引起肺部感染,而主要产生髋关节、膝关节及脊椎部骨髓中病变及淋巴结感染。但如由呼吸道吸入,亦可发生与结核杆菌完全相同的感染,难以区别。如能对已感染的牛(结核菌素试验阳性)予以控制,及对牛奶严格消毒和管理,此菌引起的感染不难控制。
医学教育网小编搜集整理了2014临床医学检验技士考试复习相关内容,供正在复习的考生参考。 此种细菌在生长特性、化学组成及毒力的潜在性上与结核杆菌极少相似。本为牛的致病菌,引起牛的结核感染,人由于食入未经消毒或已污染了此菌的牛乳而被感染。牛分枝杆菌一般不引起肺部感染医学教育|网搜集整理,而主要产生髋关节、膝关节及脊椎部骨髓中病变及淋巴结感染。但如由呼吸道吸入,亦可发生与结核杆菌完全相同的感染,难以区别。如能对已感染的牛(结核菌素试验阳性)予以控制,及对牛奶严格消毒和管理,此菌引起
3245 人抗体阳性:兰州兽研所陷布病危机,中牧实业回应赔偿金额尚未确定!
,可还原硝酸盐,细胞内寄生,可以在很多种家畜体内存活。布氏杆菌属有六种:马耳他布氏杆菌(羊型布氏杆菌)、流产布氏杆菌(牛型布氏杆菌)、猪布氏杆菌和狗布氏杆菌、林鼠布氏杆菌、绵羊布氏杆菌。其中引起人类疾病的有羊、牛、猪和狗布鲁菌。布鲁氏杆菌感染引起的布鲁氏病是一种人畜共患性全身传染病,简称「布病」,又称马耳他热、波浪热。 02.布病的威力布鲁氏病目前已经在《中华人民共和国传染病防治法》把它归类为乙类传染病,与我们更为熟悉的「非典」、「猪流感」、炭疽、艾滋病、狂犬病、乙肝等同属一类传染病。美国疾控
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