酵母核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒北京现货

特别提示：包括酵母核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：酵母核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒
英文名称：Yeast nucleoprotein / cytoplasmic protein extraction kit
产品货号：HR0135
产品规格：50T|100T

酵母核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种酵母中提取可溶性核蛋白和胞质蛋白。提取过程简单方便。制备的蛋白纯度高，保持天然活性，绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便，提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2．将蛋白提取的时间缩短至 1小时-2小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS、移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器、脱色摇床 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1．提取液制备：每 200μl蛋白提取液D中分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．酵母培养物，在 4℃，4000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
3．用 PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每 100μl体积酵母①沉淀物中加入400μl酵母核蛋白提取液A，混匀后，在30℃条件下保温15分钟。
5．4000rpm条件下离心5-10分钟，收集酵母沉淀。
6．用洗涤液洗涤酵母一次，离心收集菌体。
7．酵母沉淀物中加入 500μl酵母蛋白提取液B，混匀后，在室温条件下轻微振荡30-60分钟。
8．4000rpm条件下离心5-10分钟，收集沉淀。
9．沉淀用酵母洗涤液洗涤两次。离心收集沉淀。
10．沉淀中加入 400μl冷的酵母核提取液C，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。
11．再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟，取上清，即得到胞质蛋白。
12.在沉淀中加入 200μl冷的核蛋白提取液D，高速涡旋振荡15秒。
13．置冰上 40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。
14.在 4℃，16000×g条件下离心10分钟。
15．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到酵母核蛋白。
16．将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
【注】
① 酵母数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
② 建议用BCA 法进行蛋白定量。
③蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

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