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- MR1001
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- 2025年07月14日
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- 英文名：
Sciben
- 供应商：
南京善本
- 规格：
100T
自噬体MDC染色试剂盒
产品描述：
自噬（Autophagy）是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞食物在溶酶体内降解的过程，自噬体（Autophagosome）为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物，损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。
自噬体MDC染色试剂盒是应用一种嗜酸性荧光色素—单丹磺酰尸胺（Dansylcadaverine，MDC）用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长355 nm，阻断滤光片波长512 nm。自噬体MDC染色试剂盒（简称MDC法）适用于实验研究中悬浮或贴壁的细胞自噬体染色，又称为MDC染色液。
包装说明：
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- 用去离子水稀释10×Wash buffer至1×Wash buffer工作液。
- 收集细胞，800 g离心5 min，去除上清液，然后用500 μl的1×Wash buffer Wash buffer工作液清洗细胞1次，离心弃上清液。
- 加入适量的1×Wash buffer重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml。
- 取适量90 μl的细胞悬液至新的EP管中，加入10 μl的MDC Stain染色，轻轻混匀。
- 37℃避光染色10～30 min。
- 离心（800 g，5 min），去除上清液，收集细胞用500 μl的1×Wash buffer清洗细胞2次，离心弃上清液。
- 加入100 μl的Collection buffer重悬细胞，取适量（建议10~30 μl）滴加于载玻片上并加盖玻片。
- 荧光显微镜下观察（激发滤光片波长355 nm，阻断滤光片波长512 nm），拍照、荧光强度分析或计数每个细胞中的自噬体数量。
- 用去离子水稀释10×Wash buffer至1×Wash buffer工作液。
- 配制MDC stain染色工作液（1×Wash buffer：MDC=10:1）
- 含有细胞的培养板每孔加入500 μl 1×Wash buffer清洗细胞1次，然后移去清洗液。
- 每孔加入100 μl MDC stain染色工作液，37℃避光染色10-30 min。
- 用500 μl 1×Wash buffer清洗细胞2次，移去清洗液。
- 加入100 μl/孔Collection buffer。
- 荧光显微镜下观察（激发滤光片波长355 nm，阻断滤光片波长512 nm），拍照、荧光强度分析或计数每个细胞中的自噬体数量。
PC12细胞在镉处理12 h后使用自噬体MDC染色试剂盒群体细胞荧光强度成像拍照（上图）；Raji细胞培养48 h和PC12培养24 h后使用自噬体MDC染色试剂盒单个细胞内自噬体数量表现（下图）
1、MDC Stain和EB试剂有一定毒性请小心操作。
2、向板孔中打入液体时，务必动作轻柔，以免将细胞吹起。
3、操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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