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联硕生物
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低温
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1瓶
DMEM/F-12(Dulbecco's Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12)是一种广泛使用的基础培养基,可用于支持很多不同种类的哺乳动物细胞生长。已在 DMEM/F-12 中成功培养的细胞包括 MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞及大鼠成纤维细胞。我们针对广泛的细胞培养应用,提供了多种组分的 DMEM/F-12 改良培养基。
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文献和实验细胞留在试管中,所以在Hoechst染色时必须用聚丙烯试管。当要染大量细胞时,在250ml聚丙烯试管中最为便利。 3 加入Hoechst至终浓度为5μg/ml。我们建议用200 的原液(1 mg/ml),它是将一整瓶Hoechst粉末溶于水中(B2261, Sigma),再分装,保存浓缩的Hoechst溶液在-20℃ 4 将细胞在37℃循环水浴箱中预热,在90 min 的孵育中定期混匀试管。时间和温度对于Hoechst染色来说特别关键,所以DMEM必须预热而且试管必须完全没
并开始分裂增殖,第3天已长成较密单层,细胞贴壁均匀,形态清晰,呈多边形和梭形,细胞间略有空隙,细胞数为7.5 x 106个/ml。在此后转瓶培养的60 d内细胞数保持稳定,无明显增加和减少,无脱落,无明显形态变化,培养液中HBsAg滴度稳定在1:128~1:512之间。 而使用传统DMEM细胞培养基,只有30%和40%的细胞伸展,至第4天才长成较密单层,小方瓶与双层转瓶结果相同。至30 d 时已长成较厚的复层,并开始大片脱落,细胞数明显减少,HBsAg滴度降低,最低降到1:32 。此后细胞开始重新
280 ~ 310 M-199 275 ~ 305 IMDM 270 ~ 300 DMEM/F-12 280 ~ 310 F-10 270 ~ 300 F-12
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