荧光素Cy5标记兔IgG(细胞流式同型对照)

荧光素FITC标记抗体的方法

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark

为什么需要设置同型对照?

美天旎抗体小课堂（二）

流式课堂 | 流式对照设置之同型对照

#01 什么是同型对照？ 同型对照（Isotype Control），是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度，但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照？ 流式抗体与靶标的结合，是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞（除T细胞外）表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体，这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合，出现非特异