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文献和实验一家小公司的产品,不过实验室一直用,效果一直有保证,同期进行连接的其他同学也都连接成功。 结果: 转化后,平板上均有数量不等的菌落产生,少时4-5个,多时10来个。摇菌扩增8 h,进行菌液PCR检测(含阳性对照),检测组无阳性结果,但一直在1000 bp左右出现较弱条带,阳性组正常。提取质粒后,10 μl体系双酶切2 h,竟然在2000 bp和3000 bp处出现较弱条带(比Marker稍暗)。 特此悬赏10个叮当,请高手指点迷津。
Making Combination Markers for Size Standards on Southern Blots
approximately 100 � of the 1 ng/� dilution in 10 ml 1X glycerol stop mix. NOTE: Markers should be heated to 50 degrees C for 10 minutes prior to loading to melt the lambda cohesive ends. Digesting lambda DNA (BRL) with a specific restriction
Preparation and purification of biotin-labeled probe for ISH
product. The best ISH results are obtained when the size of the biotin-labeled probe is around 300-600 bp. To determine the size of the probe, denature 15 µl of the nick translation product in boiling water for 4 min and cool down on ice immediately
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