- ￥1850
- Solarbio
- 北京
- BC2695
- 2025年07月12日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Glucose Dehydrogenase(GCDH) Activity Assay Kit
- 库存：
100
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC2695-100T/96S
- 规格：
100管/96样
葡萄糖脱氢酶（GCDH）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC2695
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
- 试剂二：临用前加入7.5 mL试剂一溶解，用不完的试剂2-8℃保存8周；
- 试剂三：临用前每瓶加入5 mL试剂一溶解，用不完的试剂建议分装后-20℃避光可保存4周；
- 工作液的配制：按照试剂一：试剂二：试剂三为4：3：2的体积比例充分混匀，现用现配，用前37℃预热10 min。
GCDH（EC 1.1.1.47）催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H，主要存在于多种微生物和高等动物的肝脏中。GCDH是一种制备高含量低聚果糖的理想用酶，同时也是临床血糖测定的诊断用酶，可广泛用于食品工业及医药工业领域中。
GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH，利用NADH在340nm处吸光值的变化即可反映葡萄糖脱氢酶的活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
组织：按照组织质量（g）︰提取液体积(mL)为1︰5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心10 min，取上清置于冰上待测。
细胞或细菌：先收集细胞或细菌到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）︰提取液体积（mL）为500~1000︰1的比例（建议500万个细胞或细菌加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞或细菌（功率200 W，超声3s，间隔7s，总时间5min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
血清（浆）：直接检测。
二、测定步骤
- 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
- 操作表：在微量石英比色皿/96孔UV板中分别加入下列试剂：
| 试剂名称（µL） | 空白管 | 测定管 |
| 工作液 | 180 | 180 |
| 蒸馏水 | 20 | - |
| 样本 | - | 20 |
| 加入工作液即开始计时，立即混匀，于340nm处测定10s时的吸光值A1，迅速置于37℃水浴或培养箱1min（酶标仪有控温功能可将温度调至37℃），拿出迅速擦干测定1min 10s时的吸光值A2，计算ΔA测定管=A2测定-A1测定，ΔA空白管=A2空白-A1空白，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管（空白管只需做1-2次）。 | ||
- GCDH酶活计算
- 按样本蛋白浓度计算
GCDH酶活（U/mg prot）=ΔA÷（ε×d）×109×V反总÷（V样×Cpr）÷T=1607.7×ΔA÷Cpr
- 按样本质量计算
GCDH酶活（U/g质量）=ΔA÷（ε×d）×109×V反总÷（V样×W÷V样总）÷T =1607.7×ΔA÷W
- 按细胞或细胞数量计算
GCDH酶活（U/104 cell）=ΔA÷（ε×d）×109×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量（万个））÷T
=1607.7×ΔA÷细胞数量（万个）
- 按液体体积计算
GCDH酶活（U/mL）=ΔA÷（ε×d）×109×V反总÷V样÷T=1607.7×ΔA
ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103L/ mol /cm；d：比色皿光径，1cm；109：单位换算系数，1mol=109nmol；V反总：反应体系总体积，2×10-4L；V样：反应体系中样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，1min。
B、按96孔UV板计算：
将上述公式中的d-1cm改为d-0.6cm（96孔板光径）进行计算即可。
注意事项：
- 样本提取上清液置于冰上待测，且样本提取完成后建议当天提取当天内测完。
- 当A1或A2大于1.7时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定。
- 当ΔA大于1.5时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定。
- 取0.1g肝脏加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，使用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.5806-0.5291=0.0515，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.0294-0.0294=0，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0515-0=0.0515，按样本质量计算酶活得：GCDH酶活（U/g质量）=1607.7×ΔA÷W =1607.7×0.0515÷0.1=827.966U/g 质量。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验BC2690 葡萄糖脱氢酶（GCDH）活性检测试剂盒
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
快速解酒，还可减轻酒精伤害！中国团队开发的重组益生菌，或成为新型「解酒神器」
Alcohol Consumption in Mice 的研究。研究团队设计出了一种表达 hADH1B 的重组益生菌，该益生菌可帮助小鼠减少酒精吸收，延长酒精耐受时间及缩短急性饮酒后的恢复时间。更重要的是，该益生菌还可保护肝脏和肠道免受酒精刺激引起的急性损伤。 图 1 文献截图（来源：[2]） 喝酒之后，酒精（乙醇）会被胃肠道吸收而进入血液，然后通过血液循环到达肝脏，在肝脏中，乙醇脱氢酶（ADH）负责将乙醇（酒精）催化为乙醛，然后在肝脏中的醛脱氢酶（ALDH）催化的反应中迅速转化为二氧化碳和水。人们喝酒
波长590 nm进行荧光读取。最佳的读取可提供最大的动态范围、最佳的线性度以及最小的标准偏差。 3.对数据进行作图。 细胞增殖检测 用MTT细胞生长检测试剂盒(CT01)检测增殖情况，用AldeRed ALDH检测试剂盒(SCR150)分析醛脱氢酶 (ALDH)表达情况。 肿瘤干细胞表达醛脱氢酶(ALDH)水平升高。AldeRed™ ALDH检测试剂盒可使用ALDH红移荧光底物基于醛脱氢酶(ALDH)表达进行活肿瘤干细胞鉴定和分离，允许同时使用包括GFP细胞系在内的绿色荧光报告物。 1.
