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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 检测范围:
详询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科学研究
- 适应物种:
人、动物
- 标记物:
HRP(辣根过氧化物酶)
- 样本:
血清、血浆、组织液等液体样本
- 规格:
48T/96T
英文名称:Human cytokeratin fragment antigen 21-1,CYFRA21-1 ELISA kit
说明书可直接向我司客服索取
样本需求量:
植物是组织样本,固体 要求的重量是大于50mg。血清血浆50微升以上,一个样本。对大鼠小鼠液体样本需求可以适当放宽,但必须大于10微升以上。
1,样本在保持鲜重的同时,重量不能低于50mg
2,组织匀浆比例按照10%进行,相当于1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液要求用PBS,浓度是0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4我们并不要求没个样本的重量必须保持1g整数,只要大于50mg即可,相对应匀浆液按照1:9的关系随之改变即可
3,剪碎叶片组织放入碾钵,然后液氮碾磨成粉末,加入换算后的匀浆液的量
4,离心取上清
[实验原理]
人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被指标捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
备注:换算结果是乘以加入匀浆液的量,除以称取的重量,这个最终换算比例相当于乘以9g除以1ml,如果检测细胞内部,需要加一个超声破碎过程!
组织匀浆三原则:
1,对于样本要求保持鲜重
2,称取样本中的重量不小于50mg,一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平。
3,匀浆的比例选取10%,相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆。
4,匀浆液选取PBS(PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol/L)
5,匀浆过程选用组织匀浆器,冰浴上匀浆。(或者进行液氮碾磨)
6,离心取上清,离心转速选用5000转每分,时间是15分钟。取上清液待检!
“剪碎叶片组织放入碾钵,然后液氮碾磨成粉末,加入换算后的均浆液的量”这个不会处理的话,可以直接邮寄叶片我们处理。
除了人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA检测试剂盒我们还提供:
| 人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒 |
| 人脂磷壁酸(LTA)ELISA试剂盒 |
| 人乙胺碘呋酮(AD)ELISA试剂盒 |
| 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒 |
| 人鞘磷脂(SM)ELISA试剂盒 |
| 人尿游离皮质醇(UFC)ELISA试剂盒 |
| 人硫酸软骨素(CS)ELISA试剂盒 |
| 人硫酸皮肤素(DS)ELISA试剂盒 |
| 人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒 |
| 人硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒 |
| 人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒 |
| 人迟现抗原4(VLA4)ELISA试剂盒 |
| 人 橙(AO)ELISA试剂盒 |
| 人 喋呤(MTX)ELISA试剂盒 |
| 人对 甲酸(PABA)ELISA试剂盒 |
| 人苯丙氨酸(LPA)ELISA试剂盒 |
| 人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒 |
| 人β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒 |
| 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒 |
| 人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒 |
| 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒 |
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文献和实验,绵羊 Fab 片段,连接有辣根 过氧化物酶 Ready-to-use 3.5ml 2 紫色 标记溶液 3 黄色 转化-POD 需要自己配置的其他物品: 除上表所列试剂外,还需准备以下溶液。下表列出每步所需物品概览: 步骤 样品准备 section 3.2 黏附细胞, 细胞涂片和细 胞 离 心 涂 片 准 备 section3.2.1 冰冻组织 section3.2.2.2 Washing buffer:磷酸
测定AFP、CEA试剂盒校准品和国家标准品,双孔平行测定CA242、CYFRA21-1内部质控品1、2和内质控品1、2等体积混合样本后,计算回收率。 (2)刃剂量-反应曲线的线性:双孔平行测定试剂盒中校准品,将其平均值用五参数方程进行拟合。 (3)有效检测范围:标准品最高浓度为检测上限,20次平行检测样品稀释液测定结果,计算平均值X和标准差S,以X+25为检测下限。 (4)精密度:连续5出则定同一批号试剂中高低两水平质控血清,分析批内变异系数;连续测定5 d 中不同时间5批不同批号试剂的高低
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
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