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- gelatins
- 科研试剂
- JC-A7701
- 上海
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
292
- 适应物种：
人/动物/植物等
- 应用：
用于科研试剂实验
- 检测方法：
elisa法
- 检测范围：
科研试剂
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
48T/96T
检验人四加半LIM域蛋白1(FHL1)ELISA试剂盒方法：
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2. 取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3. 空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀，置37℃反应30分钟。
5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7. 洗涤，同步骤5。
8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。
人四加半LIM域蛋白1(FHL1)ELISA试剂盒把抗原与抗体的免疫反应与酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一项检测技术。该方法的主要依据有三点：
■ 抗原（抗体）能结合到固相载体的表面并保持免疫活性；
■ 抗原（抗体）与酶结合所形成的结合物仍然保持免疫活性和酶的活性；
■ 结合物与相应的抗原（抗体）反应后，结合的酶仍能催化底物生成有色物质,颜色的深浅可定量抗原的含量。
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文献和实验，因此其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备，应根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。 3.间接法测抗体 间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体（抗人免疫球蛋白抗体）以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下： 1）将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。 2）加稀释的受检血清，保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，血清
产生假阳性反应。一般说来，在 3 天内测定的血清标本可放置于 4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。 2. 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。 ELISA 中用的蒸馏水或去离子
中，能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。其次，目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制，因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外，当试剂盒以OPD为底物时，则底物溶液应在反应显色前临时配制。 三、加血清样本及反应试剂 在现在的ELISA商品试剂盒中，血清样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证
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