人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒

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检验人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒方法：
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2. 取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3. 空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀，置37℃反应30分钟。
5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7. 洗涤，同步骤5。
8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。

人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒把抗原与抗体的免疫反应与酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一项检测技术。该方法的主要依据有三点：
■ 抗原（抗体）能结合到固相载体的表面并保持免疫活性；
■ 抗原（抗体）与酶结合所形成的结合物仍然保持免疫活性和酶的活性；
■ 结合物与相应的抗原（抗体）反应后，结合的酶仍能催化底物生成有色物质,颜色的深浅可定量抗原的含量。

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