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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
277
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
检验人可的松(COR)ELISA试剂盒方法:
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2. 取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3. 空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀,置37℃反应30分钟。
5. 扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7. 洗涤,同步骤5。
8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
人可的松(COR)ELISA试剂盒把抗原与抗体的免疫反应与酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一项检测技术。该方法的主要依据有三点:
■ 抗原(抗体)能结合到固相载体的表面并保持免疫活性;
■ 抗原(抗体)与酶结合所形成的结合物仍然保持免疫活性和酶的活性;
■ 结合物与相应的抗原(抗体)反应后,结合的酶仍能催化底物生成有色物质,颜色的深浅可定量抗原的含量。
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文献和实验混匀即可。 (5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。 二、试剂准备 在临床实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤
将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。其次,目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制,因此稀释时所用的蒸馏
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