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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
273
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
检验人非红细胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA试剂盒方法:
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2. 取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3. 空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀,置37℃反应30分钟。
5. 扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7. 洗涤,同步骤5。
8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
人非红细胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA试剂盒把抗原与抗体的免疫反应与酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一项检测技术。该方法的主要依据有三点:
■ 抗原(抗体)能结合到固相载体的表面并保持免疫活性;
■ 抗原(抗体)与酶结合所形成的结合物仍然保持免疫活性和酶的活性;
■ 结合物与相应的抗原(抗体)反应后,结合的酶仍能催化底物生成有色物质,颜色的深浅可定量抗原的含量。
人非红细胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA试剂盒相关高质量试剂:
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文献和实验,但由于奶粉的成份复杂,而且封闭后的载体不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。 封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中,封闭一般是不可少的。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月
在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文(2.2)已述,ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定 中);(5)结合物及标本的稀释液;(6)洗涤液;(7)酶反应终止液。 3.1 免疫吸附剂 已包被抗原或抗体的固相载体在低温(2~8℃)干燥
不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。 封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中,封闭一般是不可少的(见2.2.2)。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月。3.2 结合物
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