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- gelatins
- 科研试剂
- JC-A7665
- 上海
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
256
- 适应物种：
人/动物/植物等
- 应用：
用于科研试剂实验
- 检测方法：
elisa法
- 检测范围：
科研试剂
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
48T/96T
检验人剪切修复交叉互补修复缺陷偶联因子1(ERCC1)ELISA试剂盒方法：
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2. 取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3. 空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀，置37℃反应30分钟。
5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7. 洗涤，同步骤5。
8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。
人剪切修复交叉互补修复缺陷偶联因子1(ERCC1)ELISA试剂盒把抗原与抗体的免疫反应与酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一项检测技术。该方法的主要依据有三点：
■ 抗原（抗体）能结合到固相载体的表面并保持免疫活性；
■ 抗原（抗体）与酶结合所形成的结合物仍然保持免疫活性和酶的活性；
■ 结合物与相应的抗原（抗体）反应后，结合的酶仍能催化底物生成有色物质,颜色的深浅可定量抗原的含量。
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文献和实验特定剪接的mRNA，相应的DNA探针对就会与该mRNA进行杂交并通过连接酶将两个DNA探针相连，连结后的DNA产物经扩增和荧光标记后，与芯片小珠上的互补DNA进行杂交并产生探测信号。这种方法虽然只能鉴别已知基因序列的剪接，但是与采用传统微阵列技术检测选择性基因剪切变化相比已经前进了一大步。 光纤芯片在检测 DNA序列微小变化方面的能力使其成为人类单核苷酸多态性(SNPs，人类基因中最常见的变异类型)研究的有力工具[7]。对人类基因进行SNPs分析可以提供打开人类基因变异大门的钥匙，是一个非常
特定剪接的mRNA，相应的DNA探针对就会与该mRNA进行杂交并通过连接酶将两个DNA探针相连，连结后的DNA产物经扩增和荧光标记后，与芯片小珠上的互补DNA进行杂交并产生探测信号。这种方法虽然只能鉴别已知基因序列的剪接，但是与采用传统微阵列技术检测选择性基因剪切变化相比已经前进了一大步。 光纤芯片在检测 DNA序列微小变化方面的能力使其成为人类单核苷酸多态性(SNPs，人类基因中最常见的变异类型)研究的有力工具[7]。对人类基因进行SNPs分析可以提供打开人类基因变异大门的钥匙，是一个非常
特异性的选择主要需要考虑四个方面：蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。 （1）蛋白特异性 针对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分，重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测，对抗体的要求是不一样的，注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不是全长表达，则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式，特殊表型的蛋白需要进行序列比对，并结合抗体免疫原序列，查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具体位点，不同位点的磷酸化意味
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