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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
165
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA试剂盒检验方法:
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2. 取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3. 空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀,置37℃反应30分钟。
5. 扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7. 洗涤,同步骤5。
8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
我们常说人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA试剂盒检测的灵敏度主要是由原料决定的,虽然检测试剂盒也可以通过调整浓度以及其它条件进行改善。但遇到批间差异大的问题,就是要原料质量过关,原料的批和批之间差异不能太大,还有就是用于生产的工艺要简单,重复性,这样可以尽量减少批间差异。所以说原料特别重要,只要是原料无论抗体和抗原都很重要。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人脂肪细胞刺激因子 (LSP)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 LSP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 LSP与单抗结合,加入生物素化的抗人 LSP ,形成
抗体结合,表现出假阳性反应。采用F(ab')或Fab片段作酶结合物的试剂,由于去除了Fc段,从而消除RF的干扰。双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响,已被列为这类试剂的一项考核指标。双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。 2.双抗原夹心法测抗体 反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定
,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备,应根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。 (三) 间接法测抗体(我公司分装TORCH及传染病试剂盒大多采用本法) 间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法(见图2-3)。操作步骤如下: (1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。 (2)加稀释的受检血清,保温反应
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