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急性呼吸窘迫综合征(ARDS)
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急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠模型
Diff-Quik 染色和细胞计数:获得BALF进行Diff-Quik染色后,显微镜下观察计数计数中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞。肺的湿/干重比:肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标,也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。每组处死动物、剪断气管后取全肺,称湿重,然后将肺置于65℃恒温箱中干燥,24h 后取出称干重,计算肺湿/干重比值。伊文氏蓝测定肺通透性:在实验结束前30min静脉注射伊文氏蓝(EBD),30mg/kg,实验结束后,开胸剪开右房,冲洗肺循环,完整取出双肺,剪去气管,清洗擦干肺组织,称重后匀浆,以每100mg肺组织1ml的甲酰胺浸泡肺匀浆,37度下孵育24小时,5000r/min离心,取上清测EBD浓度。
肺损伤后的组织病理观察(HE染色) :取右肺固定,然后将肺组织常规脱水,石蜡包埋,切片(厚度为5μm),HE染色。评分方法:取6个视野进行出血及水肿评分。
使用ELISA试剂盒检测肺泡灌洗液(BALF)中TNF-a、IL-6和IL-1β等细胞因子的含量。
应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显
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