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坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型
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武汉云克隆动物有限公司
1、大鼠坐骨组织病理检查坐骨神经组织固定24 小时后,包埋成石蜡块。石蜡块放在-20℃冰箱中冰一下,在切片机上进行切片,切片厚度4um,置于水槽中展开、捞片和贴片。石蜡切片切好后需要烤片,60℃烤片2 小时。进行Loyez染色,光镜下观察再生髓鞘的情况。2、 TUNEL检测坐骨神经组织凋亡情况坐骨神经组织切片脱蜡,蛋白酶K室温下消化,TDT酶反应液37℃孵育 1 h,0.3%H2O2抑制内源性过氧化物酶,Streptavidin-HRP 室温5min,DAB 显色,复染。阴性对照采用无酶标记液(去除TDT)代替TDT酶反应液。凋亡细胞核呈棕褐色颗粒,光镜下观察并计数凋亡细胞。3、电镜观察自噬情况坐骨神经组织固定,制备电镜样品,利用电镜在超微结构水平观察坐骨神经组织中自噬情况。
应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显
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