FITC-兔抗人血清白蛋白

双重染色法免疫荧光组织化学染色步骤

FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如，在实验设计时，选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗，相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时，由于两种一抗种属来源不同，可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗，滴加二抗时，先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育，洗涤后，滴加SABC-Cy

双向免疫扩散(Double immunodiffusion)—抗原分析实验

：0.5µg/ml牛血清白蛋白（BSA）、0.5µg/ml人血清白蛋白（HSA） 抗体：兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋 湿盒 三、实验方法 1．将已溶化的1%盐水琼脂管放58°C -60°C水浴箱中平衡温度备用。 2．将载玻片置于水平桌面上，倾注已溶化琼脂3.5-4ml，使成厚度约1.5mm琼脂板（注意：倾注速度不要过快，以免琼脂溢出载玻片；倾注过程要连续以保证琼脂板均匀、平滑）。 3．琼脂凝固后，将打孔模板置于琼脂板下，然后用打孔

单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳（图）

材料 1%琼脂（生理盐水配制）管，每管约4ml 　　载玻片 　　打孔器及打孔模板 　　微量加样器及塑料吸头 　　抗原：0.5µg/ml牛血清白蛋白（BSA）、0.5µg/ml人血清白蛋白（HSA） 　　抗体：兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋白 　　湿盒三、实验方法 1．将已溶化的1%盐水琼脂管放58℃～60℃水浴箱中平衡温度备用。 2．将载玻片置于水平桌面上，倾注已溶化琼脂3.5～4ml，使成厚度约1.5mm琼脂板（注意：倾注速度不要过快，以免琼脂溢出载玻片；倾注过程要连续以保证琼脂板均匀、平滑