FITC-兔抗牛血清白蛋白

双重染色法免疫荧光组织化学染色步骤

FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如，在实验设计时，选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗，相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时，由于两种一抗种属来源不同，可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗，滴加二抗时，先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育，洗涤后，滴加SABC-Cy

间接法免疫荧光组织化学染色步骤

核为亮蓝色荧光。 荧光免疫细胞化学染色 原代培养胚胎14天大鼠端脑细胞，波形蛋白免疫反应阳性细胞呈绿色荧光（FITC标记二抗) 注意事项： ①如标本为甲醛固定的组织切片，需增加抗原修复步骤； ②对于易脱片的细胞样品在固定后增加晾干时间，可起到防脱片的作用； ③如果结果分析显示有非特异性染色，则需在正常血清封闭之后再用5％牛血清白蛋白封闭。 2．检测抗体法 (1)切片或涂片固定后，置于染色湿盒内，滴加未标记的特异性抗原于标本表面，37℃孵育30分钟，PBS漂洗2次

ELISA抗原竞争法检测样品中sIL-2R含量

含量。 【材料和试剂】 （1）         纯化或重组的IL-2R蛋白（α链，P55，CD25，Tac抗原）（40.000u/ml） （2）         FITC标记的抗IL-2R McAb（0.2μg/ml）：FITC为异硫氰酸荧光素，这里仅作为半抗原使用，而不作为荧光素标记。 （3）         碱性磷酸酶标记的兔抗FITC抗体（酶标抗体） （4）         对硝基苯磷酶盐底物液；用pH9.8的二乙醇胺缓冲液溶解，配成浓度为1mg/ml