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- 2025年07月16日
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- 文献和实验
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‘-20℃保存
- 保质期：
有效期一年
- 库存：
30
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 规格：
50次
| 编号 | 成分 | 十孔盒包装（去纸托） |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL（亮黄盖） |
| 试剂二 | 成分 PCR 引物混合液 | 100 uL（白盖） |
| 试剂三 | 成分 PCR 阳性对照 | 50 uL（黄盖） |
| 试剂四 | 超纯水 | 1 mL（本色盖） |
| 试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次（成分见下） |
| 试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL（白盖） |
| 试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL（绿盖） |
| 试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL（红盖） |
| 试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
简并性引物对PCR扩增有无影响?
有影响。简并数量应尽量少。
通常一条引物中简并的碱基不要超过4处，如果简并的碱基数过多，则会造成反应体系中有效引物的量相对减少，此时应适当增加引物的使用量。但引物量过大，容易引起非特异扩增，应加以注意。
适合的模板添加量是多少?
根据基因组DNA、质粒DNA及反转录产物等模板种类不同，PCR反应的适合模板添加量也不同。 特别是使用PrimeSTAR® HS DNA Polymerase时，过剩的模板量有时会对PCR扩增产生阻害作用。 另外，使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时，根据模板种类、模板使用量及模板质量可调整PCR反应条件。
使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时，模板可按以下推荐量添加（50 μl反应体系）：
· Human genomic DNA：5～200 ng
· E.coli genomic DNA: 100 pg～100 ng
· cDNA Library：1～200 ng
· λDNA：10 pg～10 ng
· 质粒DNA：10 pg～1 ng
PCR产物 (3‘端附有A碱基时) 经末端平滑后，克隆于去磷酸的平滑末端载体时，其PCR产物需不需要5′末端磷酸化?
需要。一般的PCR用引物5′末端都不带磷 (除非在引物合成时已特别标记)。使用这种引物进行PCR的PCR产物经末端平滑化后，与去磷酸的平滑末端载体连接之前，PCR产物必须进行5′末端磷酸化。
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文献和实验录病毒相似的结构基因外，还包括 4 个辅助基因，vif、vpr、nef、vpu 和 2 个调节基因 tat 和 rev 。 HIV 21 是慢病毒中最具特征性的病毒，第一个慢病毒载体系统即以此病毒为基础进行构建的。慢病毒载体的构建原理就是将 HIV 21 基因组中的顺式作用元件 ( 如包装信号、长末端重复序列 ) 和编码反式作用蛋白的序列进行分离。 载体系统包括包装成分和载体成分：包装成分由 HIV 21 基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建，能反式提供产生病毒颗粒所需的蛋白；载体
病毒载体、整合率低的腺相关病毒载体、只整合分裂细胞的传统逆转录病毒载体，有鲜明的特色。大量文献研究表明，慢病毒载体介导的目的基因长期表达的组织或细胞包括脑、肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬细胞等。 慢病毒载体不表达任何 HIV-1 蛋白，免疫原性低，在注射部位无细胞免疫反应，体液免疫反应也较低，不影响病毒载体的第 2 次注射。 四、慢病毒载体的构建 1. 构建原理 慢病毒属于逆转录病毒科，但其基因组结构复杂，除 gag、pol 和 env 这 3 个和单纯逆转录病毒相似的结构基因外
蛋白的复合物晶体结构，又基于晶体结构分析，设计并合成了特异性及体内安全性显著提高的雷公藤红素衍生物 19-048，证明了雷公藤红素的体内毒性，可以通过靶标发现及基于结构的化学优化而降低，同时表明，抑制 PRDX1 有望用于治疗结直肠癌。值得注意的是，本研究使用了汉恒生物提供的针对 PRDX1 的 CRISPR-Cas9 慢病毒。 下面，我们一起来看具体的研究结果： 首先，作者通过 RNA 测序得到用雷公藤红素处理后的差异表达基因，然后用 OTTER 富集雷公藤红素的氧化还原相关靶蛋白，发现雷公
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