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文献和实验【实验 目的 】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验 原理 】 当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗体
免疫组化基础知识 免疫组织化学的概念: 免疫组化就是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。 免疫组化实验所用的抗体有哪些? 免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫
的抗体双重染色。目前,最常用的是最后一种方法。 不同种属来源的抗体双重染色,两种抗体 间无交又反应.特异性较高,即使细胞内抗原量很少也能检测。但是,当两种抗原存在于同一部位而其中之一浓度较高,占绝对优势时将妨碍另一种抗原染色,此种情况应分别染色,首先染色含量较少的抗原,再显示含量丰富的抗原。在该方法中应用最多的是把SABC法或SP法的实验流程重复两次,其中两种不同特异性抗体(可以是小鼠或大鼠单克隆抗体和兔多克隆抗体的任何两个组合),与一抗对应的不同种属生物素化二抗和两种不同显色
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