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- xuanke
- XK-XB-1353
- 国产/进口
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详询
- 细胞类型：
人包皮成纤维细胞
- 肿瘤类型：
详询
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
HFF-1
- 生长状态：
贴壁细胞
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
人
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
成纤维细胞样
- 免疫类型：
详询
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
皮肤；包皮
本公司生产的细胞总量约为5×105个/瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
三．注意事项
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月；
2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；
3.HFF-1（人包皮成纤维细胞）只可用于科研。
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文献和实验，5min），弃上清液； ⑤ 用DMEM培养液将沉淀的细胞团制成细胞悬液； ⑥ 细胞计数，调整细胞密度； 3. 有血清培养：原代细胞和传代后的1—3代细胞用10%胎牛血清的DMEM培养液维持培养； ① 以5×10-5 个/ml的密度将细胞接种于培养瓶中。于37℃、5%CO2 培养箱内培养。每2—3d换液一次； ② 原代培养至成纤维细胞汇合成单层后，按常规方法传代； 4. 无血清培养：用DMF培养液支持已建立细胞系的包皮成纤维细胞的生长和增长； ① 取在含血清条件下已生长汇合
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