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货号:PCR-96-LP-FLT-W
0.1ml白色无裙边96孔低架平顶PCR板,未灭菌
上海熹垣生物科技有限公司优势供应!
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文献和实验人。5.加完MTT反应3-4h后,从培养箱取出96孔板的动作要轻柔,避免振荡结晶,使其滑落.你可以试着将96孔板倾斜30度角,然后用*尖慢慢吸,有的细胞可以用排枪一起吸,有的则要耐心的一个个用*头吸,*尖的力度和方向要保证每个孔都一致。不要让*头接触到孔底,且一旦倾斜孔板后就不要反复倾斜放平,这样也会使结晶脱落。6.用医用的注射器加上针头吸取液体的,吸取时要把板子斜放,沿着壁吸取就好了!这次MTT我用1ml针头仔细吸培养液,觉得比其它方法可靠,一般不会吸走紫色结晶.避免清除上清而改进的方法由于一般可离心
凝胶:将1g凝胶加入30 ml的DEPC水中,浸泡过夜。用DEPC水洗涤膨胀的凝胶数次,以除去可溶解的葡聚糖。换用新配制的TE(PH7.6)。 5.8.2 取1ml一次性注射器,去除内芯推扞,将注射器底部用硅化的玻璃纤维塞住,在注射器中装填Sephadex G-50凝胶。 5.8.3 将注射器放入一支15 ml离心管中,注射器把手架在离心管口上。1600g离心4分钟,凝胶压紧后,补加Sephadex G-50凝胶悬液,重复此步直至凝胶柱高度达注射器0.9 ml刻度处
底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。当外源片段插入到pBS质粒的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白失活, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 因此在同样条件下含重组质粒的转化子在生色诱导培养基上只能形成白色菌落。在麦康凯培养基上,α-互补产生的Lac+细菌由于含β-半乳糖苷酶,能分解麦康凯培养基中的乳糖,产生乳酸,使pH下降,因而产生红色
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