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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
源性细胞
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
64
- 英文名:
U937
- 生长状态:
良好
- 年限:
2年
- 运输方式:
常温避光
- 物种来源:
其他
- 规格:
T25
细胞介绍
该细胞是由Nilsson K实验室于1974年从一名37岁的患有恶性组织细胞性淋巴瘤的白人男性的胸水中分离建立的。1979年来的研究显示该细胞在人混合淋巴细胞培养物上清、佛波酯、VitD3、\z-IFN、TNF和维A酸的诱导下可以向终末单核细胞分化。该细胞不合成免疫球蛋白,EBV阴性;可产生溶菌酶、(3-2-微球蛋白,受PMA刺激后可产生TNF-ct;表达C3R;可作转染宿主;表达Fas,对TNF和抗Fas的抗体敏感。
细胞特性
1)来源:淋巴瘤
2)形态:单核细胞,悬浮生长
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
人组织细胞淋巴瘤细胞(U937)运输和保存:
使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后,请先在显微镜下检查细胞生长状态,并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后,再次检查细胞状态。若状态良,可按照以下细胞培养步骤进行细胞后续处理操作。若发现可疑污染物,请及时与我们取得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备 RPIVM-1640 培养基,添加 NaHC031.5g八,
D-葡萄糖2.5g八,酮酸钠O.llg八),90%;胎牛血清,10%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:
将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将
细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
人组织细胞淋巴瘤细胞(U937)对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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文献和实验静置数小时; 5. 待植块牢固贴壁后,轻轻翻转培养瓶,使培养液均匀覆盖住植块。在37℃、5%CO2 的培养箱中继续培养; 培养24小时后换液,去除未贴壁细胞后继续培养,以后每周换液2—3次; 6. 3天后,去除未贴壁的植块。每3天换半量培养液。
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