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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
31
- 生长状态:
良好
- 年限:
2年
- 运输方式:
常温避光
- 物种来源:
兔
- 规格:
>5×105细胞数
细胞详述:
睾丸间质细胞成群分布在曲精小管之间,胞体呈圆形,椭圆形或不规则形,胞体较大,直径约20μm,胞质呈嗜酸性,细胞核呈圆形或卵圆形,常位于中央,染色较淡,有1~2个核仁线粒体多,呈管嵴状,无分泌颗粒。睾丸支持细胞是存在于雄性睾丸间质中的主要细胞类型,其主要功能是分泌和合成睾丸酮,睾丸酮在刺激精子发生、精子成熟及性功能的维持等方面具有重要作用。目前,以睾丸支持细胞为靶向的药物研究备受关注。体外培养的睾丸支持细胞能直接反应药物对该细胞作用的特点,使分离纯化睾丸支持细胞成为必要的前提条件。
使用兔原代睾丸支持细胞:
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常睾丸组织。
2)细胞鉴定:3β-HSD免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)兔原代睾丸支持细胞生长方式:梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
产品兔原代睾丸支持细胞的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
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文献和实验实验材料: 1. 正常兔晶状体组织; 2. 不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 注射器; 4. 培养器具:培养瓶或皿( 用多聚赖氨酸包被)、眼科剪、镊子等; 培养方法: 1. 空气注射处死大兔,在无菌条件下清除巩膜外肌肉及结缔组织后将眼球浸入含双抗的1×PBS(pH7. 2 )浸泡5min ,移入超净工作台内; 2. 用含双抗的1×PBS(pH7. 2 )冲洗 组织
较简单;但容易产生杂质如成纤维细胞等,成纤维细胞生长快,故培养之细胞质量较差;培养的大多数细胞无收缩性;且原代细胞的获得需3~4周,获得大量平滑肌细胞耗时长(17)。既往酶消化法较组织块法复杂、精细;适宜的酶浓度和培养时间的确定较为困难;然而在较短时间内可获得大量的平滑肌细胞,1996年有学者报道(Chambers(18)等)酶消化法纯度为70%。可见一种快速、高效、高纯度的酶消化法培养膀胱平滑肌的方法显得尤为重要。 本实验研究两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑
培养液:MEM(GIBCO),20%FBS,双抗100IU/ml; 原代细胞培养:取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头,于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中,用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。 传代: (1)吸除培养瓶内旧培养液。 (2)D-Hanks液冲洗2遍。 (3)加入消化液少许,以能覆盖瓶底为限。 (4)倒置显微镜观察发现细胞胞质回缩、细胞间隙增大时,立即终止消化。 (5)吸除消化液,向瓶底注入D-Hanks液
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