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- 信帆生物
- 国产
- XJC5259
- 2025年07月16日
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信帆生物
产品简介：
转氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之间氨基转换反应的一组酶，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)主要存在于心肌、骨骼肌、肝脏，以心肌含量最高，肝脏次之，AST 能够催化天门冬氨酸和 a-酮戊二酸的氨基转移作用，形成谷氨酸和草酰乙酸。天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(赖氏微板法)其检测原理是 AST 催化天门冬氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，其反应公式如下：
L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸→草酰乙酸+L-谷氨酸
二硝基-苯-肼与α-酮酸反应生成相应的二硝基-苯腙，在碱性条件下二硝基-苯腙的吸收光谱有差异，通过酶标仪检测在 500-520nm 处差异最大，以等摩尔浓度计算出丙-酮酸的生成量，进而计算酶的活性。100T 该检测试剂盒可检测 50 个样品(不含标准品)，该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
自备材料：
1、蒸馏水或去离子水
2、离心管、水浴锅或恒温箱
3、96 孔板、酶标仪
操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：
①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃
保存 1 个月有效，用于 AST/GOT 的检测。
②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存 1 个月
有效，用于 AST/GOT 的检测。
③(选做)样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计
算单位蛋白重量组织或细胞内的 AST/GOT 含量。
2、配制 AST 显色基液(1×)：取 AST 显色基液(5×)一份加入蒸馏水 4 份稀释即可使用。
3、制作 AST 标准曲线：取丙-酮酸标准 1 支，准确加入丙-酮酸标准稀释液 1ml，充分混匀，即配制成丙-酮酸标准(100mmol/L)，4℃保存备用。临用前，取适量的丙-酮酸标准 (100mmol/L)，按丙-酮酸标准(100mmol/L)：丙-酮酸标准稀释液=1：49 的比例混合，即为丙-酮酸标准工作液-丙-酮酸标准(2mmol/L)，按下表制备标准曲线。最好设定平行检测孔，求平均值。
4、AST 酶促反应：按照下表设置对照孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免
产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
5、AST 测定：混匀，室温放置 5min，以蒸馏水调零，酶标仪 505nm 处测定对照孔、测定孔的吸光度(即为 A 对照、A 测定)。
计算：以标准活力单位(24、61、114、190)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标
准曲线，测定孔的吸光度减去对照孔的吸光度的差值(即 A 测定-A 对照)，从标准曲线查得AST活力单位。
参考范围：成年健康人血清 AST：8~28 卡门单位/ml
注意事项：
1、 二硝基-苯-肼显色液溶解以后，如果仍然有结晶析出，应弃用。
2、 AST 显色基液(5×)有一定腐蚀性，请小心操作。
3、 AST Assay buffer 使用前应 37℃提前孵育 5min。
4、 由于赖氏法的特点，在绘制标准曲线时每个点最好做 3 孔的重复测定，求出各标准管的吸光度均值，减去“0”号管吸光度均值后，对照赖氏单位绘制标准曲线。
5、 血清中 AST 活性在室温可以保存 2 天，4℃保存 1 周，-20℃保存 1 个月。
6、 成批样本测定时，一般无需每份样本都做自身血清对照，以试剂空白代替即可。
7、 对于超过正常范围的血清样本，应该进行复测，复测时每份样本都应做自身血清对照。
8、 严重黄疸、脂血或溶血的血清，可能会引起测定孔的吸光度增高，因此检测该类样本时应做自身血清标本对照。
9、 当样本的酶活力大于 190 卡门单位时，应将样本进行 5~10 倍稀释后再行测定。
10、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6 个月有效。4℃运输，4℃保存。
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文献和实验临床上可根据酶浓度的变化用以辅助诊断。若酶浓度变化由细胞坏死或细胞膜通透性变化引起，表示脏器或组织损伤；若为细胞内酶合成增加所致，提示组织再生、修复、成骨或异位分泌，或提示有恶性肿瘤的可能；若为酶排泄障碍引起者说明有梗阻存在。同工酶的分析与鉴定则能反应疾病的部位、性质和程度。 一、转氨酶及其同工酶 （一）生物化学特性 转氨酶或称氨基转移酶是一组催化氨基在氨基酸与a-酮酸间转移的酶类，丙氨酸氨基转移酶（ALT）和（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）是其中最重
近日，广州中医药大学第二临床医学院检验科研究人员发表论文，旨在探讨酶学参考方法应用于卫生部临床检验中心常规化学室间质评中的可行性。研究指出，参考方法可以应用于室间质评，对解决临床检验结果的正确性提供了重要依据。该文发表在2014年第06期《重庆医学》杂志上。 选取5个临床常规检测系统和参考方法同时检测临床检验中心2012年第1次室间质评样本和患者血清肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶
（1）反映肝实质损害的指标 主要包括丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）等，其中ALT是最常用的敏感指标，1%的肝细胞发生坏死时，血清ALT水平即可升高1倍。AST持续升高，数值超过ALT往往提示肝实质损害严重，是慢性化程度加重的标志。 （2）反映胆红素代谢及胆汁淤积的指标 主要包括总胆红素（TBil）、直间接胆红素、尿胆红素、尿胆原、血胆汁酸（TBA）、γ—谷氨酰转肽酶（γ—GT）及碱性磷酸酶（ALP）等。肝细胞变性坏死，胆红素代谢
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