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100
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信帆生物
简单介绍:定量检测苪酮酸激酶活性
注意事项:特异性好,定性实验,操作简单
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
着所测量细胞因子对应的抗体类型,并且与不同的荧光染料相结合,以便在混合物中区分不同的磁珠。样品加入后,成功捕获抗体的磁珠的荧光分子标记能够将它们与空磁珠区分开来。基于磁珠的检测方法一般使用由Luminex公司开发的Luminex免疫磁珠,这种微珠需要特殊的仪器进行检测;或者使用与微珠兼容的传统流式细胞仪检测。Luminex的相应仪器设备 可以区分100到500种不同比率荧光染料的免疫磁珠,磁珠一般含有两种或三种染料,因而不同的染料比率能够形成多达100到500种荧光而被识别,而传统流式细胞仪只能测量
内,大多数细胞器内及细胞质的pH值都在 7.0 左右,然而溶酶体内的 pH 值就比较低,mCherry 的 PK 值比较低,可以用于标记溶酶体内的蛋白。 光稳定性:荧光蛋白被不断激发的过程中,会逐渐失去发光能力。对于高质量成像、荧光信号定量分析以及详细描述生物模型,需要选择光稳定性好的荧光蛋白。在普通荧光成像中,例如激光共聚焦对光稳定性要求不是很高,而超分辨荧光成像对光稳定性要求比较高。 成熟时间:指荧光蛋白翻译后正确折叠并形成发光结构所需的时间。成熟时间较长的荧光蛋白不适合标记短寿命的蛋白,目的
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