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- 信帆生物
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- xf20194615
- 2025年07月12日
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室温,避光,12个月
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100
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信帆生物
简单介绍:用于Bradford法测量总蛋白质含量
注意事项:主要由G-250、乙醇等组成,适用于测定蛋白浓度。
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文献和实验质测定的灵敏度，最低检出量为1μg蛋白。染料与蛋白质结合迅速，大约为2分钟，结合物的颜色在1小时内稳定。所以本法操作简便，快速，灵敏度高，稳定性好，是一种测定蛋白质含量的常用方法。 【实验材料】 1. 实验器材 721型分光光度计；试管；移液管；容量瓶。 2. 实验 试剂 (1)标准蛋白质溶液：称取10mg牛血清白蛋白，溶于蒸馏水中并定容至100ml，制成100μg/ml的溶液。 (2)考马斯亮蓝G-250
分光光度计；玻璃比色皿一套；考马斯亮蓝G250； 牛血清蛋白；超纯水。 1.2 试液的制备： 牛血清蛋白标准溶液（1000ug/ml）的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中，加入超纯水溶解并定容。 考马斯亮兰G250 试剂 称取100mg考马斯亮兰G250，溶于50ml95％的乙醇后，加入120ml85％的磷酸，用水稀释至1升。 2. 结果与讨论 2.1 校正曲线的绘制 准确吸取1000ug/ml牛血
nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，最小可测2.5μg/mL蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。 考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝
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