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- 信帆生物
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- xf20194125
- 2025年07月08日
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信帆生物
简单介绍:免疫组化封闭液
注意事项:主要由蛋清和叠氮钠组成,以此替代生物素。
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文献和实验灭活内源性酶及封闭内源性生物素 在生物体组织内均含有一定量的内源性酶和内源性生物素，如富含血细胞的组织标本有大量具有活性的过氧化物酶，肝、脾、肾、脑及胚胎组织中富含生物素。 如采用过氧化物酶检测系统或碱性磷酸酶和NBT/BCIP显色系统进行免疫组织化学染色时．酶的作用是催化底物，使显色剂显色，而组织中的内源性酶同样也能催化底物，使其显色，这就影响免疫组织化学染色的特异性。在使用亲和素试剂的免疫组织化学染色中，内源性生物素易结合亲和素，形成亲和素一生物素复合物，导致假阳
，拿出室温冷却6分钟，再微波续热至沸腾后完全室温冷却 4.滴加5%BSA封闭液,37℃反应30分钟。甩去多余液体,不洗 5.滴加一抗，4℃反应过夜。所配一抗的浓度为1µg/ml 6.PBS缓冲液(PH7.2-7.6)洗10分钟×3次，滴加生物素化二抗IgG(抗兔或抗鼠)37℃反应30分钟 7.PBS缓冲液(PH7.2-7.6)洗10分钟×3次，滴加试剂SABC，37℃反应30分钟，PBS洗30分钟×3次 8. DAB室温显色,镜下控制反应
是不是做 Western 的时候，会遇到这样的情况呢？没错，就是背景很脏。造成背景脏的原因有很多，比如一抗没洗干净，或者二抗没洗干净，还有就是封闭的时候不完全。但其实，封闭液也是你们很容易忽略的一个环境哈。封闭液有几种？除了脱脂奶粉和 BSA 还有啥你们能想到的？第一种封闭液就是脱脂奶粉，这是异常便宜的封闭液品种，当然也应该是你们最常用的封闭液配方了。（甚至我们用过特仑苏）但是，你们应该注意到的是，脱脂奶粉中有大量的生物素，也就是说你做的蛋白要是用生物素标记的，一抗也是抗生物素的。那用脱脂
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