磷钨酸负染色液(3%)

透射电镜的基本结构和原理

(如重金属盐等)“包埋”低电子密度的样品，结果在图像中背景是黑暗的，而样品像“透明”的光亮。两着之间的反差正好相反，故称为负染色。对颗粒状的生物材料的研究而言，负染色技术较之超薄切片方法具有分辨率高(可达15?魡) 、简单快速等优点。因此在生物学研究中得到越来越广泛的应用,可以显示生物大分子、细菌、病毒、分离的细胞器以及蛋白质晶体等样品的形状、结构、大小以及表面结构的特征,尤其在病毒学中，负染色技术成为不可取代的实验技术。 （一）负染色液的制备 用作负染色的物质应具有：①较强的电子散射能力

肌肉组织染色法

Mallory氏磷钨酸苏木素染法(简称P、T、A) 操作方法： （1）固定于Zenker氏固定液的组织，如系10%甲醛固定的组织切片，可再经Zenker氏液处理，如不处理亦可染色，但其结果欠佳 （2）石蜡切片如系Zenker氏液固定的组织，或曾经Zenker氏液处理过的切片，在染色之前需经0.5%碘酒精脱汞，水洗后再经0.5%硫代硫酸钠的脱碘。 （3）经 蒸馏 水洗后，将切片置于0.25%高锰酸钾溶液中5分钟。 （4）经 蒸馏 水洗

非标记抗体免疫电镜技术

片段。在抗体与标本作用后，再加入铁蛋白与抗体结合，从而显示组织内抗原的所在部位。后者则用磷酸钨负染后，直接电镜观察。 二、材料及试剂 1．待检病毒材料  如：粪便，气管分泌物、脑脊髓液、组织培养液等。 2．高速离心机 3．已知抗体 4．磷钨酸 5．琼脂糖 6．其它 三、操作方法 1．经典法 （1）将被检病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀释的特异性免疫血清0.1ml充分混合。 （2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。 （3）以17 000r/min～23