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信帆生物
简单介绍:通过TTC染色,检测花粉活力,也可以测定种子的生活力,不过染色时间稍长。
注意事项:TTC是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,还原后生成红色不溶于水的三本甲腙,进而判断花粉活力。
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文献和实验,则表示有过氧化物酶存在,花粉有活力,能发芽;如无色或黄色,则表示已失去活力,不能发芽。 2.观察2─3个制片,每片取5个视野,统计100粒,并计算其发芽率。 Ⅲ.氯化三苯四氮唑法(TTC法) 原理 见实验71种子发芽率的快速测定中的TTC法。 仪器药品 显微镜 镊子 载玻片、 盖玻片 0.5%TTC溶液
盖玻片。 3. 观察:在蓝光下(wavelength=495 nm)用光学显微镜观察。有活力的花粉粒显示荧光(FCR+)。 注意:醋酸荧光素,是无极性、无荧光的分子,穿入到花粉粒中。它被花粉的酯酶类水解释放荧光素,一个极性荧光分子,当花粉粒的膜是完整的,荧光素会在花粉粒的内径积累,就会在蓝光下显示荧光。FCR检测可以让我们知道花粉粒酯酶的活性和膜的完整性。
、授粉日期、授粉人。等最后一个处理完后十天,检验结实率和结籽率。将得到的结果填入表1-6。 (二)染色鉴定法(TTC法) TTC即2、3、5-三苯基四唑氯化物。主要原理在于检验花粉呼吸过程中去氧酶的活性。具有生活力的花粉的脱氢酶,在催化去氢的过程中,把氢转移到其他的物质上去,使用TTC与催化过程中产生的氢结合成红色化合物,从而使具有生活力的花粉变为红色。 1.先配制下列溶液 (1)磷酸缓冲液 :在100毫升的蒸馏水中,溶解0.832克的磷酸氢二钠和0.273克的磷酸二氢钾,调整PH
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