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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
33
- 生长状态:
良好
- 年限:
2年
- 运输方式:
常温避光
- 物种来源:
人
- 规格:
>5×105细胞数
产品使用:
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
我们推荐使用人原代食管成纤维细胞培养基。
细胞特性:
1)细胞来源于手术切除的正常食管组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
人原代食管成纤维细胞详述:
食管是咽和胃之间的消化管,哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层、外膜
成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分,其中外膜主要都是成纤维细胞构成的疏松结缔组织,食
管通过其与食管周围的器官相连。黏膜下层,为厚的疏松结缔组织构成,内部包含食管腺,可分泌粘液排
入食管腔。
食管癌的发生中由正常成纤维细胞转化而来的活化的癌相关纤维母细胞是肿瘤间质微环境内的主要效应
细胞,研究证实,包括食管癌在内的多种肿瘤组织内的癌相关纤维母细胞,与正常成纤维细胞相比,在
形态结构、生长方式、增殖活性、运动能力等发面均发生了显著变化,并且能够分泌大量的促进肿瘤细
胞增殖、血管新生的信号分子以介导上皮-间质之间复杂的相互作用。
人原代食管成纤维细胞的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快
解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过
85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮
细胞能够再次贴壁。
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文献和实验开始时,我的细胞用胶原酶消化5h接种玻璃培养瓶,1.5h后吸出细胞液至另一培养瓶培养以去除成纤维细胞,原瓶内成纤维细胞加培养液继续培养,24h观察,发现转瓶后心肌细胞未贴壁,培养液中为大量细胞碎片状东西以及未贴壁的细胞悬浮,仅见极少量的成纤维细胞贴壁生长,接种24孔板也是这样(24孔板为新,非重复使用),接连几次都是这样,很是郁闷。而原瓶内分离的成纤维细胞生长良好,且可见少量心肌细胞贴壁成团生长,有搏动,一直疑惑不解什么原因导致转瓶后细胞贴壁失败。经过将近一个月的摸索,终于发现问题所在了! 写
-1前后,以体温的升高幅度表示IL-1的活性,或定期测定血清中某些急性期蛋白的含量,如血清淀粉样蛋白A,血清淀粉样蛋白P等。 总之,由于IL-1的生物学活性比较广泛,其检测方法亦多种多样,但每种方法均有其缺点,往往需要结合使用。T细胞增殖法简便、易行且敏感,但样品中若混有IL-2,则可协同促有丝分裂原刺激T细胞增殖,从而干扰IL-1的测定。血清中的TNF同样可以刺激成纤维细胞的增殖,也可用成纤维细胞测定法,但特异性较差。放免法可排除其它因子的干扰,但此法仅测得IL-1的抗原性,不能完全代表其生物学活性。
,可以协同促有丝分裂原刺激T细胞或胸腺细胞发生有丝分裂,同时IL-1可以刺激T细胞产生IL-2或其它T细胞生长因子,并使之表达相应的受体。因此用细胞增殖法检测IL-1可有直接增殖法和间接增殖法两种。 (1)直接增殖法:IL-1在促有丝分裂原存在的情况下,能够促使胸腺淋巴细胞和某些体外建株的T细胞克隆生长,因此测定这些细胞的增殖情况即可反映IL-1的活性。小鼠胸腺细胞测定法操作简单,比较常用,缺点是缺少特异性,因为IL-2亦可协同促有丝分裂原刺激胸腺细胞增殖。D10G4.1(一种小鼠T
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