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信帆生物
产品名称:大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒(CTAB沉淀法)
简单介绍:基因组DNA的试剂盒,可进行酶切、PCR等下游实验
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文献和实验摘 要: 通过直接在大肠杆菌碱裂解上清中加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB), 优化CTAB 与质粒DNA 量的比例、质 粒DNA 选择性释放溶液的选择和TritonX-114 的使用, 建立了简单、易行的大规模质粒DNA 纯化工艺。纯化质粒DNA 的质量检测结果显示, CTAB 纯化的质粒DNA 无菌体RNA 污染, 菌体基因组DNA、内毒素和蛋白含量分别小于 100 ng/mg、50 EU/mg 和10 μg/mg 质粒DNA, OD260/OD
g/mL 无 DNA 酶的 RNA 酶,37 ℃ 温育 1 h,以除去残留的 RNA。6. 重复步骤 4、5。1 g 细胞大约能提取到 2 mg DNA。(二)从植物组织中提取基因组 DNA【实验试剂与器材】1. CTAB 抽提液:2% (w/v) CTAB (十六烷基三甲基溴化铵),100 mM Tris.Cl,pH8.0, 20 mM EDTA,pH8.0,1.4M NaCl2. CTAB/NaCl 溶液:10% CTAB,0.7M NaCl配制方法:在 80 mL 双蒸水中溶解 4.1 g
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
荧光定量PCR(Real-time PCR)是目前基因表达定量分析的重要检测手段,已经为越来越多的研究者所采用。“好的开始是成功的一半”,Perrez-Novo等(Perrez-Novo et al., 2005)曾报道获得高质量RNA对后续PCR定量结果的准确性是非常重要的,而高质量RNA是获得高质量cDNA的必要条件,所以本文着重介绍一下如何获得高质量cDNA。 高质量cDNA应具备以下几个特点:无基因组DNA残留、能准确反应出样本真实的转录情况和信息完整且浓度适当等特点。
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