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鼻腔给药的动物模型与鼻黏膜毒性

不同促进剂对DDPC膜的破坏作用。 4、用生化指标进行评价鼻黏膜受损时会释放出膜蛋白及酶，通过测定一些特定蛋白和酶的释放量，即可检测黏膜受损的情况。通常用大鼠在体鼻腔灌流技术进行，将含药溶液通过鼻腔循环灌流，灌流一定时间后收集循环液，测定其中蛋白质和酶的总量，或特定酶的量。有人认为此模型与实际给药条件相差太大，包括灌流时间过长；灌流时会造成对黏液层的破坏；灌流体积远大于实际给药体积。因此建议使用体内法：大鼠鼻腔给药后15min，通过食管插管，用生理盐水冲洗鼻腔并收集、测定冲洗液中酶和蛋白质的量

实质等同性（蛋白质组学）

）乙酸 [ 若固定谷粒蛋白，则以 10%（m/V）TCA 替代 ]。 ( 2 ) 敏化液：30%（V/V）乙醇，0.2%（m/V）硫代硫酸钠，0.5 mol/L 乙酸钠。 ( 3 ) 银染液：0.25%（m/V）硝酸银。 ( 4 ) 显影液：0.24 mol/L 碳酸钠，200 μl 的 37% 甲醛（终浓度 0.0074% )。 ( 5 ) 终止液：0.04 mol/L EDTA 。 2.4.3 Sypro   Ruby 蛋白染色（ BioRad ， UK

【转载】包涵体表达的蛋白的复性

体，通常用低浓度的变性剂,过高浓度的尿素或盐酸胍会使包涵体溶解，如2M尿素在50mM Tris pH7.0-8.5左右,1mM EDTA中洗涤。此外可以用温和去垢剂TritonX-100洗涤去除膜碎片和膜蛋白。[3] 1.3.3溶解：一般用强的变性剂如尿素（6-8M）、盐酸胍（GdnHCl 6M），通过离子间的相互作用，打断包涵体蛋白质分子内和分子间的各种化学键，使多肽伸展，一般来讲，盐酸胍优于尿素，因为盐酸胍是较尿素强的变性剂，它能使尿素不能溶解的包涵体溶解，而且尿素分解的异氰酸盐能导致多肽