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- 信帆生物
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- XF2019239
- 2025年07月09日
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信帆生物
产品名称：改良Barth溶液(无钙)
简单介绍:漂洗卵母细胞
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文献和实验土），用于吸附并灭活RNA酶。尽管现仍有Macaloid出售NL Chemicals）， 但氧钒核糖核苷复合物和RNA酶的蛋白质抑制剂更常用。下述程序的优点是速度快，并能同时处理很多样品。 一、细胞的裂解 单层细胞的裂解 悬浮培养的细胞或组织单细胞悬液的裂解 a．单层细胞的裂解 a）吸出培养液，以7ml用冰预冷的无钙镁离子磷酸缓冲盐溶液PBS冲洗细胞培养皿内的单层细胞，重复1次，将平板置于冰上直至所有单层细胞冲洗完毕。也可将平板放在一块铝板上，再将铝板置于冰盘上。 b）直径为90
液，以7ml用冰预冷的无钙镁离子磷酸缓冲盐溶液PBS冲洗细胞培养皿内的单层细胞，重复1次，将平板置于冰上直至所有单层细胞冲洗完毕。也可将平板放在一块铝板上，再将铝板置于冰盘上。 （2）直径为90mm的培养皿需加0.5ml RNA提取缓冲液， 并使之遍布整个平板的表面。 RNA提取缓冲注液 0.14mol/L NaCl 1.5mmol/L MgCl2 10mmol/L Tris.Cl（pH8.6） 0.5%NP-40 1mmol/L二硫苏糖醇（DTT） 100单位/ml胎盘RNA
6）亦可。细胞在使用前应进行有无支原体污染的检查。 培养液：应根据试验所用系统和细胞类型来选择适宜的培养基。对于 V79和 CHO 细胞，常用最-低必需培养基（MEM，Eagle）、改良 Eagle培养基（DMEM）加人10%胎牛血清和适量抗菌素。对于 TK6 和 L5178Y细胞，常用 RPMI 1640培养液，加人10%马血清（培养瓶培养）或20%马血清（96孔板培养）和适量抗菌素（青霉素、链霉素）。 胰蛋白酶/EDTA溶液：用无钙、镁 PBS配制，胰酶的浓度为0.05 %，EDTA 的浓度
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