小鼠肝癌细胞H22标记luciferase

动物活体光学成像的概念

动物活体光学成像（Optical in vivo Imaging），指利用光学的探测手段结合光学探测分子对实验动物进行成像，来获得动物体内生物学信息的方法。根据探测方式的不同，光学成像可分为生物发光成像、荧光成像、上转换荧光成像、切伦科夫成像和 X-ray 成像等。其中，最常用到的是生物发光成像和荧光成像。生物发光是用荧光素酶（Luciferase）基因标记细胞或 DNA，而荧光技术则采用荧光报告基团（GFP、RFP、Cyt 及 dyes 等）进行标记。 动物活体光学成像通过将目的基因、细胞

荧光标记怎么选择？

内，大多数细胞器内及细胞质的pH值都在 7.0 左右，然而溶酶体内的 pH 值就比较低，mCherry 的 PK 值比较低，可以用于标记溶酶体内的蛋白。 光稳定性：荧光蛋白被不断激发的过程中，会逐渐失去发光能力。对于高质量成像、荧光信号定量分析以及详细描述生物模型，需要选择光稳定性好的荧光蛋白。在普通荧光成像中，例如激光共聚焦对光稳定性要求不是很高，而超分辨荧光成像对光稳定性要求比较高。 成熟时间：指荧光蛋白翻译后正确折叠并形成发光结构所需的时间。成熟时间较长的荧光蛋白不适合标记短寿命的蛋白，目的

外泌体标记方法干货分享，4 种标记法任你选

使用的好处。 图10 未标记外泌体和 NIR 标记外泌体的原子力显微镜图片 Chem Commun (Camb). 2018 Jun 26;54(52):7219-7222. 五、用 Gaussia luciferase（gluc）和截断的 lactadherin 标记： 将 gLuc-lactadherin 构成融合表达的质粒，再将此质粒转染细胞，使细胞分泌的外泌体带有强的萤光素酶活性。将标记的外泌体进行静脉注射入小鼠体内，看外泌体在组织的分布情况。 图11 将表达