0.45μm尼龙膜北京现货

一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法

1～6），与阳性对照（含有OSsec27p的质粒）一致（Lane 8），而阴性对照（野生型烟草基因组DNA）中未出现（Lane 7），说明结果可信。但还需要用斑点杂交的方法进一步确认其序列信息。 2.2 PCR-dot-blot 将1～4号及7号PCR产物回收纯化除去引物，与OSsec27p的DNA溶液一同调整DNA浓度约为20ng/μl，一同用芯片点样仪点于尼龙膜上（斑点直径约500～780μm），每次点样均设置阳性和阴性对照，各样品的位置如图2左侧所示。然后以生物素标记的OSsec27p

Western Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)

下来。根据被转移的蛋白分子量大小，要选择不同孔径的硝酸纤维素膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越 牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm，蛋白的转移就很难进行了。因此，我们通常用0.45μm和0.2μm两种规格的硝酸纤维素膜。大于20kD的蛋白就 可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了，如果用0.45μm的膜就会发生“Blowthroμgh”的现象。从膜的质地上来 看，最重要的指标就是单位面积上能够结合的蛋白的量。硝酸纤维素膜的结合能力主要与膜的硝酸纤维素的纯度

Western blot中NC膜和PVDF膜的选择及其特点

力的结合在一起，虽然这其中的机制还不是十分清楚，但由于硝酸纤维素膜（NC膜）的这个特性，而且易于封闭非特异性结合，从而得到了广泛的应用。在非离子型的去污剂作用下，结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小，要选择不同 孔径的硝酸纤维素膜（NC膜）。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm，蛋白的转移就很难进行了。因此，我们通 常用0.45μm和0.2μm两种规格的硝酸纤维素膜。大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用