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- 文献和实验
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- 保存条件:
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月,-80°C不超过1172个月
- 规格:
50ug/100ug
- 物种Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
- 来源原核表达
- 宿主E.coli
- 内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
- 亚细胞定位细胞膜, 线粒体
- 预测分子量14.5kDa
- 实际分子量15kDa(差异分析请参阅说明书)
- 片段与标签Thr34~Pro128 with N-terminal His Tag
- 缓冲液成份磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
- 性状冻干粉
- 纯度> 90%
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文献和实验与一些内源性的物质(如葡萄糖醛酸、甘氨酸、硫酸等)结合或经甲基化、乙酰化排出体外。药物的结合反应,常常使其转化为无活性的代谢物,且极性增加,以便药物排出体外。 药物的结合反应包括葡萄糖醛酸结合、硫酸化、乙酰化、甲基化、谷胱甘肽结合、氨基酸结合及缩合反应等。葡萄糖醛酸结合反应是体内生物转化最重要、最普遍的结合反应。葡萄糖醛酸基的直接供体是尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)(见图1)。 图1 葡萄糖醛酸结合反应 葡糖醛酸基转移酶(UGT)催化的葡萄糖醛酸化代谢反应是以尿苷5’-二
亲和力在微摩尔范围。一些融合蛋白在0.2% Triton X-100或0.25% Tween 20存在下不能有效结合,而其他融合蛋白则不受影响。 缓冲条件为pH7.0到8.5,盐浓度可高达1M,但不能使用变性剂。如果要去除MBP融合部分,可用位点特异性蛋白酶切除。检测:可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。GST:GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶,它的天然大小为26KD。将它应用在原核表达的原因大致有两个,一个是因为它是一个高度可溶的蛋白
产生大量的可溶性的融合蛋白。谷胱甘肽S-转移酶(GST)、麦芽糖结合蛋白(MBP)以及硫氧还蛋白(Trx)均已经被证实能非常成功地生产正确折叠、有生物活性的蛋白质,能明显提高在E.coli细胞质中产生的融合蛋白的可溶性,并能抑制包涵体的形成[159,194]。其中每一种都备有方便的纯化方法,可将融合蛋白与细胞污染物分开。已经建立了多种对融合蛋白进行位点特异性裂解的方法,方法的选择通常由特定蛋白的组成、序列及物理性质决定[199]。可采用诸如溴化氰(Met↓)、羟胺(Asn↓Gly)、等试剂或低pH
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