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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月,-80°C不超过836个月
- 规格:
50ug/100ug
- 物种Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
- 来源原核表达
- 宿主E.coli
- 内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
- 亚细胞定位分泌
- 预测分子量41.2kDa
- 实际分子量41kDa(差异分析请参阅说明书)
- 片段与标签Gly161~Tyr262 with N-terminal His and GST Tag
- 缓冲液成份磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
- 性状冻干粉
- 纯度> 97%
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文献和实验择它们进行 GST 标签去除时,可串联一个 HiTrap Benzamidine FF(High Sub) 预装柱,因其可以特异性结合丝氨酸蛋白酶、胰蛋白酶和类胰蛋白酶。这样仅用一步就实现酶的去除并获得纯的切割后的目标蛋白。 酶切注意事项 1. 柱上酶切前通常需要进行酶切条件的摸索:可通过一定蛋白样品预酶切以确定最佳反应条件及酶用量。对于不易酶切的蛋白,可通过增加酶量及延长反应时间提高酶切效率。 2. 酶切效率可能会由于一些物质的影响而降低,如在蛋白
转染是将核酸导入真核细胞中的过程,是细胞生物学、基因表达和基因抑制实验中的关键步骤。转染是采用除病毒感染外的其他方法将核酸(DNA 或 RNA)人工导入细胞的过程。采用各种化学、生物学或物理方法导入外源性核酸会改变细胞的特性,从而实现细胞基因功能和蛋白质表达研究。 转染后,导入的核酸可以瞬时性地存在于细胞内,只表达一段时间且不会复制,也可以稳定地整合至受体基因组内,随着宿主基因组的复制而复制。 转染的目的 转染的两个主要目的是生成重组蛋白,或特异性地提升或抑制转染细胞中的基因表达。因此,转染
对35,000个人类基因所设计),专门用于解决E.coli中重组蛋白表达的瓶颈问题。 文章一开始就提到,在E.coli中表达真核蛋白的成功率很低,限制因素之一就是细菌和哺乳细胞的密码子使用频率不同;限制因素之二mRNA的二级结构导致翻译的低效率和蛋白的低产量;限制因素之三是信号肽的存在。而使用QIAgene E.coli预制表达载体则综合考虑了密码子使用频率的问题,同时消除了容易引起mRNA的二级结构的重复序列和其他因素。针对限制因素之三的信号肽因素,我们都知道在真核细胞中,糖基化蛋白和分泌
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